胡黄连苷Ⅱ对脑缺血损伤后神经元特异性烯醇化酶表达的影响

摘要

目的：通过正交试验法验证胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血损伤的神经保护作用并优化其治疗的最佳剂量及时间窗。
　　方法：应用双侧颈总动脉结扎法建立大鼠前脑缺血模型，按照正交试验设计分组，经腹腔注射胡黄连苷Ⅱ干预治疗。甲苯胺蓝染色法观察神经细胞结构;流式细胞术观察细胞早期凋亡率;免疫组织化学法和蛋白免疫印迹法(Western blot)定性、定量检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达;反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测NSE mRNA转录水平。
　　结果：胡黄连苷Ⅱ治疗大鼠脑缺血损伤的最佳时间和剂量:根据甲苯胺蓝染色显示为脑缺血2.0h腹腔注射胡黄连苷Ⅱ10mg/kg;流式细胞术检测显示为脑缺血1.5h腹腔注射胡黄连苷Ⅱ10mg/kg;免疫组织化学法分析为脑缺血2.0h腹腔注射10mg/kg;Western blot分析为脑缺血2.0h给予10mg/kg; RT-PCR显示为脑缺血1.5h给予10mg/kg。
　　结论：根据用药剂量最小化和治疗时间窗最大化的原则综合评价，胡黄连苷Ⅱ治疗脑缺血损伤的最佳治疗时间窗为脑缺血1.5-2.0 h，腹腔注射胡黄连苷Ⅱ10mg/kg。