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基于重氮树脂抗蛋白吸附电泳涂层的制备及其性能确定

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摘要

毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)以其分离效率高、分析时间短、消耗试剂少等特点,受到越来越多的关注,毛细管电泳极其适用于分离分析蛋白质,但是由于蛋白质的吸附作用,严重影响了蛋白质的分离效果,在毛细管内壁上涂覆一层聚合物,抑制蛋白吸附是目前主要采用的方法。根据是否发生化学键合可分为物理吸附涂层和化学键合涂层,各有优缺点,如何能结合两者的优点,制备具有高质量、高性能的毛细管电泳涂层成为一个关键的问题。
  本文利用本论文利用层层自组装(LBL)技术,用水溶性感光高分子取代毒性较强的硅烷化试剂,在毛细管内壁上建立具有结构可控的自组装薄膜,在紫外光照射作用下,感光高分子诱导原位交联反应,从而在毛细管内壁上形成共价键合的自组装涂层,并利用制备的涂层分离蛋白质混合物,取得了较好的结果。本论文研究工作如下:
  1.将聚乙烯吡咯烷酮(PVP)水解后产物,通过层层自组装原理在毛细管内壁上构筑DR-(PVSA)多层膜,离子键在紫外灯照射下转化为共价键,反复循环从而制备多层的共价键合涂层。利用该涂层分离数种碱性蛋白质,不仅可以实现基线分离,而且涂层的重现性和涂层稳定性好。
  2.用水溶性的感光聚合物重氮树脂(DR)取代硅烷化试剂,在毛细管内壁上制备DR-聚苯乙烯磺酸钠涂层,通过离子键层层自组装超薄膜,然后利用紫外光照使离子键转化为共价键,从而在毛细管内壁上构建出多层的结构可控的DR-PSS共价键合涂层。DR/PSS涂层具有抑制蛋白吸附的能力。
  本论文所研究的涂层毛细管制备技术结合了物理吸附和化学键合涂层方法的诸多优点,只需经过光照交联即可形成结构可控的共价键合涂层,本论文的实验结果进一步证明,这种涂层毛细管制备技术是一种简单快捷、高效、重现性好、绿色环保的方法。

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