海藻酸钙敷料的体外止血效果及止血机制的研究

摘要

目的：探讨海藻酸钙敷料的体外止血效果及止血机制。
　　方法：抽取健康志愿者肘静脉血，与38 g/L的枸橼酸钠按1:9比例混匀。通过动态凝血实验评价海藻酸钙敷料的体外止血效果，设纳吸棉组、医用棉纱布组和空白组作为对照；将1ml枸橼酸钠抗凝血滴加至5mg海藻酸钙敷料上，室温静置2min，经漂洗、固定后，扫描电镜下观察材料与血液的相互作用，设纳吸棉组和医用棉纱布组作为对照；分离红细胞并制成40％的红细胞悬液，取1ml红细胞悬液滴加至5mg海藻酸钙敷料上，静置15 s，用生理盐水洗掉未黏附的红细胞，加入1ml生理盐水，室温下孵育1小时，扫描电镜下观察红细胞形态，设纳吸棉组与医用棉纱布组作为对照；分离红细胞，取沉淀红细胞1ml于刻度试管中，分别用4ml不同浓度的（10g/L，5 g/L，2.5g/L)海藻酸钙敷料浸提液悬浮红细胞，观察30 min，60min，120 min后红细胞沉降情况，然后分别混匀、涂片，显微镜下观察红细胞聚集程度，设生理盐水组作为空白对照；分离富血小板血浆（PRP)，PRP分别与不同浓度的（10 g/L，5 g/L，2.5 g/L)海藻酸钙敷料浸提液于37。0共孵育，用流式细胞仪检测⑶62P阳性血小板百分率，设生理盐水组作为空白对照;用Fluo-3，AM负载PRP，洗涤后加入不同浓度的（10 g/L、5g/L、2.5g/L)海藻酸钙敷料浸提液，37℃避光孵育，激光共聚焦显微镜下观察血小板内钙离子荧光。
　　结果：动态凝血实验表明，海藻酸钙敷料能明显加速内源性凝血进程，止血效果优于纳吸棉和医用棉纱布；海藻酸钙敷料与抗凝血接触后，扫描电镜下可见致密的纤维蛋白网形成，其中网罗大量血细胞，纳吸棉组与医用棉纱布组仅见少量红细胞及血小板黏附，未见纤维蛋白网形成；扫描电镜下可见，红细胞与海藻酸钙敷料相互作用后，细胞膜有伪足样改变，纳吸棉组与医用棉纱布组红细胞形态无明显变化；海藻酸钙敷料浸提液呈剂量与时间依赖性促进红细胞沉降，组间两两比较差异有显著性意义(弃〈0.01);显微镜下可见海藻酸钙敷料浸提液能促进红细胞叠连；海藻酸钙敷料浸提液呈剂量依赖性提高CD62P阳性血小板百分率，组间两两比较差异有显著性意义(P〈0.01);随着藻酸钙敷料浸提液浓度的增加，血小板内钙离子荧光强度增加。
　　结论：海藻酸钙敷料止血效果良好，可通过释放钙离子、引起红细胞聚集、活化红细胞和血小板等多个环节促进血液凝固，说明该敷料在止血领域有极高的临床使用价值。

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引言

第一章 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 主要材料试剂

1.1.2 主要仪器

1.2 实验对象

1.3 血液和浸提液制备

1.3.1 枸橼酸钠抗凝血的制备

1.3.2 海藻酸钙敷料浸提液的制备

1.4 实验方法

1.4.1动态凝血实验

1.4.2 海藻酸钙敷料与枸橼酸钠抗凝血的相互作用

1.4.3 海藻酸钙敷料对红细胞的影响

1.4.4 对血小板的影响

1.4.5 统计学分析

第二章 实验结果

2.1动态凝血实验

2.2 与枸橼酸钠抗凝血的相互作用

2.3 对红细胞的影响

2.3.1 对红细胞形态的影响

2.3.2 对红细胞沉降的影响

2.3.3 对红细胞叠连的影响

2.4 海藻酸钙敷料浸提液对血小板的影响

2.4.1 对血小板CD62P的影响

2.4.2血小板钙离子浓度

第三章 讨论

结论

参考文献

综述: 止血材料的研究进展

攻读学位期间的研究成果

致谢

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