应激对饥饿诱导的Ghrelin、Orexin及甘丙肽分泌的影响及潜在机制研究

摘要

目的： 急性和慢性应激可对食欲和能量平衡稳态产生明显影响。限制能量摄入可引起体内皮质醇水平和肾上腺素水平的升高。本研究目的拟探讨应激对不同程度禁食大鼠体重和血浆ghrelin、o re xin以及甘丙肽水平的影响及潜在机制。 方法： 雄性Wistar大鼠（200～350 g）。动物房室内恒温（25±1℃）、湿度50±5%、昼夜循环光照为12 h:12 h。所有动物遵循《青岛大学实验动物保护和和使用管理方法》。实验开始前大鼠禁食48h，每日8:00Am进食，自由饮水。选取84只大鼠随机分为三组（n=28），第一组大鼠，给予正常需要的摄食量（20 g/只/天）。计算10天内10只正常大鼠每日的摄食量的平均数作为大鼠日常食物摄入量。第二组大鼠，给予日常所需摄食量的50%；第三组大鼠，给予日常所需摄食量的25%，持续10日。测定不同摄食情况下大鼠体重的改变。经颈总动脉内导管分别给大鼠注射皮质醇（4μg/k g）、肾上腺素（4μg/k g）或两者混合物，取注射前、注射后30 min、60 min和120min血样。采用放射免疫法测定血浆中ghre lin、o re xin和甘丙肽水平。采用酶联免疫吸附法测定血浆中促肾上腺皮质激素、肾上腺素和皮质醇水平。采用血糖仪测定血浆中血糖水平。 结果： 与100%摄食量组大鼠或与摄食前相比，50%摄食量和25%摄食量组大鼠体重均呈明显下降（P<0.05）。 与摄食前相比，100%摄食量和50%摄食量组大鼠血浆促肾上腺皮质激素（ AC TH）、肾上腺素和皮质醇水平均显著增高，且呈显著量效依赖关系（P<0.05~0.01）。在25%摄食组大鼠，血浆 ACTH、肾上腺素和皮质醇的水平虽有增高，但差异无统计学意义（P>0.05）。与摄食前相比，100%摄食量组、50%摄食量组、以及25%摄食组大鼠血浆ghre lin、ore xin和甘丙肽水平均显著降低（P<0.05）。与100%摄食量组相比，25%和50%摄食量组大鼠血浆ghre lin、ore xin和甘丙肽水平显著升高（P<0.05~0.01）。 与磷酸盐缓冲液对照组、与注射前或与100%和50%摄食组相比，颈总动脉注射皮质醇，25%摄食组大鼠血浆ghre lin水平显著升高（P<0.05）；与磷酸盐缓冲液对照组或与注射前相比，颈总动脉注射肾上腺素或颈总动脉联合注射肾上腺素和皮质醇，50%和100%摄食组大鼠血浆ghrelin浓度显著下降（P<0.05）。 与磷酸盐缓冲对照组或与注射前相比，颈总动脉注射肾上腺素，50%摄食组大鼠血浆orexin水平显著降低（P<0.05）；与磷酸盐缓冲对照组或与注射前相比，颈总动脉注射联合注射皮质醇和肾上腺素，100%摄食组大鼠血浆orexin水平显著下降（P<0.05）。 与磷酸盐缓冲对照组或与注射前相比，颈总动脉注射皮质醇，50%摄食组大鼠血浆甘丙肽水平显著降低（P<0.05）；与磷酸盐缓冲对照组或与注射前相比，联合注射肾上腺素和皮质醇，100%和50%摄食组大鼠血浆甘丙肽水平显著下降（P<0.05）。 与磷酸盐缓冲组或与注射前相比，颈总动脉注射皮质醇、肾上腺素或联合注射肾上腺素和皮质醇，100%和50%摄食组大鼠血浆葡萄糖水平均显著升高（P<0.05-0.01）。 结论： 应激可降低神经递质对摄食的调节，高强度禁食可扰乱正常机体能量平衡调节系统。肾上腺素是应激摄食调控的关键激素，皮质醇在此具有协同效应。肾上腺素抑制禁食大鼠体内 ghrelin、orexin和甘丙肽的分泌，这可能是导致体重降低的原因之一。

目录

引言

材料与方法

1实验动物

2实验药物与仪器

3主要试剂配置

4实验分组

5颈总动脉置管

6多肽和血糖测定

7统计学分析

实验结果

1不同摄食量对大鼠体重的影响

2 不同摄食量对大鼠血浆促肾上腺皮质激素、肾上腺素和皮质醇水平的影响

3不同摄食量对大鼠血浆ghrelin、o rexin和甘丙肽水平的影响

4皮质醇和肾上腺素对不同摄食量大鼠血浆ghrelin水平的影响

5皮质醇和肾上腺素对不同摄食量大鼠血浆orexin水平的影响

6皮质醇和肾上腺素对不同摄食量大鼠血浆甘丙肽水平的影响

7皮质醇和肾上腺素对不同摄食量大鼠血糖水平的影响

讨论

结论

参考文献

综述：神经内分泌与代谢调控

攻读学位期间研究成果

致谢

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