肉苁蓉（Cistanche deserticola Ma）种内变异性研究

摘要

肉苁蓉(Cistanchedeserticola)为列当科(Orobanchaceae)肉苁蓉属(Cistanche)植物的全草，是一种具有寄生生长特性的沙生药用植物。寄生于超旱生小乔木梭梭(Haloxylonammodendron)的根部。具补肾、壮阳、润肠通便的独特药效，市场需求量很大。由于分布区域有限和无保护的乱采滥挖，野生资源量急剧下降，寄主和肉苁蓉都已沦为濒危植物，被载入《中国珍稀濒危植物》红皮书。为了解资源结构现状，以便更好的保护和利用资源，采用传统的形态学性状分析和RAPD分子标记结合的方法对濒危植物肉苁蓉种质资源进行了种内变异类型和遗传多样性研究。 在野生肉苁蓉种群内，以花冠裂片颜色的差异为基础，初步筛选出9种变异类型。用生殖器官的13个外部形态学性状进行差异量化分析，得到变异系数(CV)最大为34.04﹪，最小9.04﹪；相似性系数在0.2727-0.8181之间，用UPGMA法制作了形态学性状聚类图；对9种变异类型又进行了RAPD分析。摸索并建立了肉苁蓉RAPD-PCR的最佳反应条件。从60个随机引物中筛选出扩增效果好、重复性好的12个引物，共扩增出360条带，其中109条为多态性带，平均多态率30.27﹪，低于植物种间变异水平。变异类型间遗传距离变化范围为0.1133-0.4251，种内遗传多样性Hs=0.1123，基因分化系数Gst=0.2323，种内遗传变异占总变异的23.23﹪。用UPGMA法制作了RAPD分子标记聚类图。 采用两种方法的结果，综合分析了肉苁蓉种内遗传多样性，划分出种内存在的不同变异类型及其亲缘关系，掌握肉苁蓉种内遗传多样性的丰富度。为资源的合理保护、利用和可持续发展、人工种植等研究提供重要的理论依据。

目录

文摘

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论文说明：英文缩略词表

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第一章绪论

1.1肉苁蓉研究综述

1.1.1药用价值研究

1.1.2植物基础研究

1.1.3细胞学及胚胎学研究

1.1.4寄生机理研究

1.1.5肉苁蓉资源分布及利用情况

1.1.6肉苁蓉资源人工繁殖现状

1.1.7药用植物遗传多样性的研究

1.2研究目的和意义

第二章形态学性状变异性研究

2.1实验材料

2.1.1研究区自然概况

2.1.2研究材料

2.2实验方法

2.2.1形态学性状调查

2.2.2形态学性状差异的数据统计

2.3结果与分析

2.3.1变异类型形态学性状的变异性分析

2.3.2变异类型间形态学性状的相似性分析

2.3.3变异类型间形态学性状的聚类分析

2.4讨论

第三章肉苁蓉种内DNA水平变异性研究

3.1实验材料

3.2实验方法

3.2.1样品基因组DNA的提取方法优化

3.2.2 DNA检测方法

3.2.3 RAPD反应体系

3.2.4 RAPD数据分析

3.2.5仪器与试剂

3.3结果与分析

3.3.1样品基因组DNA检测

3.3.2肉苁蓉基因组DNA提取方法比较的电泳检测

3.3.3 RAPD反应体系的建立

3.3.4随机引物的筛选

3.3.5变异个体的RAPD分子标记多态位点分析

3.3.6肉苁蓉种群内DNA水平变异特征指数分析

3.3.7变异类型间DNA水平的遗传距离分析

3.3.8分子标记聚类分析

3.4讨论

3.4.1肉苁蓉基因组DNA提取方法优化

3.4.2肉苁蓉种内不同类型DNA水平的遗传变异

第四章结论

4.1表型变异与基因型变异结果的一致性

4.1.1肉苁蓉种内变异类型

4.1.2变异类型的亲缘关系

4.1.3变异类型的变异范围

4.2肉苁蓉形态学性状变异与其基因型变异的相关性

4.3两种研究方法的互补性

4.3.1形态学性状研究方法

4.3.2 DNA水平变异性的研究方法

4.3.3两种研究方法在研究肉苁蓉变异性结果上的互补性

参考文献

致谢

附录

作者简介