豆科牧草体细胞胚再生体系构建及其差异性比较研究

摘要

采用MS基本培养基，以6份豆科牧草（中苜2号、草原3号、百脉根、蒙农红豆草、沙打旺、柱花草）为试验材料，利用正交设计研究了不同外植体、外源激素种类及浓度对供试材料愈伤组织诱导和体细胞胚产生的影响，并比较6份材料愈伤组织诱导和体细胞胚产生的差异性。研究结果表明，6份豆科牧草材料愈伤组织诱导及体细胞胚诱导与分化的条件均得到较好优化，为实现豆科牧草外源基因的高效遗传转化和生物技术育种提供技术支撑。
　　1．基因型、外植体类型和外源激素种类及其浓度均显著影响供试豆科牧草愈伤组织的诱导及体细胞胚的发生。中苜2号苜蓿、草原3号苜蓿、百脉根和柱花草无论愈伤组织诱导还是体细胞胚的产生均表现良好，是进行遗传转化的理想材料。
　　2.外植体类型、2,4-D、KT、NAA、6-BA的浓度对6份豆科牧草材料愈伤组织诱导率的影响均达到极显著水平（P＜0.01），其中最主要的影响因素是2,4-D浓度，其次为外植体类型，下胚轴的体细胞胚形成和再生能力相对较强，在不同基因型中均表现出极高的稳定性，是最佳外植体。
　　3.NAA浓度、6-BA浓度对6份豆科牧草材料体细胞胚产生率的影响达到极显著水平（P＜0.01），KT浓度和CH浓度对体细胞胚产生率的影响程度因材料不同表现不同。
　　4.综合分析比较6份豆科牧草材料试验结果，可知高浓度的生长素2,4-D和低浓度的NAA、KT、6-BA组合能够更好地促进愈伤组织的发育，愈伤组织诱导最佳激素配比范围为2,4-D(2.0~4.0mg/L)+ NAA(0~0.1mg/L)+KT(0.5~1.0mg/L)+6-BA(0.1~1.0mg/L)。细胞分裂素6-BA、KT与较低浓度的NAA配合使用更适于供试材料体细胞胚的产生，并且添加适量CH后体细胞胚产生的效果更好，诱导体细胞胚产生的最佳激素配比范围为NAA(0.01~1.0mg/L)+KT(0~2.0mg/L)+6-BA(1.0~2.0mg/L)+CH(1.0~4.0g/L)。

目录

缩 略 语 表

1 引言

1.1 概述

1.2几种重要豆科牧草再生培养研究进展

1.3豆科牧草再生研究现状

1.4研究目的及意义

2苜蓿体细胞胚再生体系的建立

2.1材料与方法

2.2 结果与分析

2.3 讨论

2.4小结

3百脉根体细胞胚再生体系的建立

3.1材料与方法

3.2 结果与分析

3.3 讨论

3.4小结

4蒙农红豆草体细胞胚再生体系的建立

4.1 材料与方法

4.2 结果与分析

4.3 讨论

4.4小结

5沙打旺体细胞胚再生体系的建立

5.1 材料与方法

5.2 结果与分析

5.3 讨论

5.4小结

6柱花草体细胞胚再生体系的建立

6.1 材料与方法

6.2 结果与分析

6.3 讨论

6.4小结

7 不同种类豆科牧草体细胞胚再生体系建立的异同性

7.1 材料与方法

7.2 结果与分析

7.3 讨论

7.4 小结

8 结论

9 论文创新点

10 下一步研究展望

致谢

参考文献

附图

作 者 简 介