层粘连蛋白增强脱细胞真皮基质支架上骨髓间充质干细胞粘附力的实验研究

摘要

目的:观察层粘连蛋白(Laminin，LN)、牛血清蛋白(Bovine serum albumin，BSA)对脱细胞真皮基质(Acellular dermal mat rix，ADM)支架上骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesechymal stem cells，BMSCs)黏附的影响，为组织工程应用提供一定的实验基础。
　　方法:①培养正常人的BMSCs制成细胞悬液，原代及传代培养形态学观察;采用EnVision二步法标记，鉴定BMSCs分化为成纤维母细胞样细胞的特征。②无菌条件下将脱细胞真皮基质置入12孔板中（真皮面向上），实验组分别给予Ln、BSA预先包埋，对照组不做预包埋处理。接种细胞悬液，在种植细胞后第9天取真皮片进行细胞计数和MTT检测。
　　结果:经Ln预涂组其MTT的OD吸光值明显高于预涂BSA及对照组。
　　结论:LN能促进BMSCs在脱细胞真皮基质上的聚集、黏附及增殖，为组织工程生物瓣的研究提供了一定的实验基础。

目录

声明

摘要

缩略词表

引言

第一章 BMSCs的获取、培养与鉴定

1 材料与方法

1．1 主要试剂和仪器

1．2 BMSCs的获取与培养

1．3 相关表型的检测

2 结果

2．1 BMSCs倒置显微镜观察

2．2 相关表型的检测

3 讨论

3．1 BMSCs

3．2 BMSCs的体外分离、纯化和扩增

3．3 BMSCs细胞传代后细胞的生物学特性

结论

参考文献

第二章 层粘连蛋白(Ln)促进骨髓间充质干细胞粘附研究

1 材料与方法

1．1 主要试剂和仪器

1．2 分组

1．3 真皮基质片细胞计数

1．4 MTT检测

1．5 组织学观察

1．6 统计学处理

2 结果

2．1 细胞计数及MTT检测

2．2 BMSCs粘附后的组织学检查

2．3 扫描电镜所见

3 讨论

3．1 种子细胞间的粘附力

3．2 脱细胞真皮基质(ADM)

3．3 层粘连蛋白的结构及生物学特性

3．4 MTT检测

结论

参考文献

文献综述 组织工程心脏瓣膜的研究进展

致谢

攻读学位期间已发表学术论文