豹猫细胞体外培养体系建立及其生物学特性分析

摘要

对豹猫6种组织进行原代培养建系，最后选择3种组织来源细胞即剑状软骨源细胞、心脏源细胞和肺源细胞。以该3种细胞为实验材料研究豹猫细胞的生物学特性。
　　在本研究中，主要进行了如下实验:细胞的原代建系及传代培养的形态观察、细胞贴壁率计算、冻存复苏率对比、3种细胞生长曲线的对比、支原体污染检测、核型分析等。
　　在形态学观察方面，3种来源细胞各有显著特征但均属于成纤维样细胞。贴壁率能力分析显示，心脏源细胞最弱;肺源细胞代次P9之前易贴壁，P9之后细胞贴壁增殖及传代比较困难;剑状软骨源细胞最易贴壁。将三种细胞冻存前后存活率进行实验对比发现:解冻后相比于冻存前均有所下降，随着细胞代次的增高，细胞的存活率也有所下降。生长曲线对比发现，曲线均呈“S”型曲线，曲线显示剑状软骨源细胞增殖的最快，肺源细胞次之，心脏源细胞最慢。支原体污染检测细胞污染情况为阴性。在豹猫细胞核型分析研究中发现，染色体数目为2n=38，18对为常染色体，形态类型为7M+11SM;1对为性染色体，其形态类型X为ST。本研究为日后利用豹猫细胞、保存遗传信息及深入研究其生物学特性提供了一个好的依据和实验材料。

目录

声明

摘要

第一章 豹猫三种组织成纤维细胞体外培养体系的建立

1．1 引言

1．2 实验材料

1．3 实验方法

1．3．1 豹猫原代细胞的获得

1．3．2 豹猫组织细胞的纯化

1．3．3 豹猫细胞的传代培养

1．3．4 豹猫组织细胞的冻存

1．3．5 豹猫组织细胞的复苏

1．3．6 豹猫组织细胞冻存前、后细胞存活率的测定

1．4 结果

1．4．1 豹猫三种组织细胞P6，P9，P12的形态观察

1．4．2 豹猫三种组织细胞纯化

1．4．3 豹猫组织源细胞冻存前、复苏后存活率的测定

1．5 讨论

2．1 引言

2．2 材料

2．2．1 主要试剂

2．2．2 实验器材

2．2．3 实验细胞

2．3 实验方法

2．3．1 豹猫细胞的贴壁率测定

2．3．2 豹猫三种组织细胞的生长曲线测定

2．3．3 对豹猫三种组织细胞支原体污染检测

2．3．4 豹猫细胞染色体核型分析

2．4 结果

2．4．1 细胞贴壁率计算

2．4．2 细胞生长曲线绘制

2．4．3 细胞支原体检测

2．4．4 豹猫细胞染色体核型分析

2．5 讨论

2．6 结论

参考文献

附录

致谢