二巯基丁二酸与不同营养素联合应用治疗铅中毒的实验研究

摘要

目的：铅中毒是影响儿童健康的重要问题之一，研究表明，铅在极低的水平就可引起儿童智力发育方面的损害，且这种损伤在一定程度上是不可恢复的。由于儿童的智力水平同一个国家的人口素质和未来的经济发展有着重要的联系，因此，铅对儿童的危害在世界范围内受到广泛的重视。探讨有效的、可行的儿童铅中毒的治疗方法，对保护儿童健康成长有着重要意义。螯合剂治疗是治疗铅中毒的首选方法，但由于它的一些副作用，在儿童中的应用受到了一些限制。最近的研究发现在对染铅动物进行螯合治疗的同时，补充维生素、矿物质或氨基酸无论在排铅效果方面，还是在恢复铅所导致的机体生化指标的改变方面，都优于单一的螯合剂或营养素治疗。然而，螯合剂与营养素联合使用，能否在保证其驱铅效果的的情况下，降低螯合剂的使用剂量，以更适合于儿童用药，至今未见报道。本研究旨在通过探讨低剂量二巯基丁二酸(meso-2，3-dimercaptosuccinicacid，DMSA)与不同营养素联合应用时对铅中毒小鼠的治疗效果，为儿童铅中毒提供一个可行的治疗方案。 方法：1.实验动物选择及分组昆明种雌性小鼠65只，先分为空白对照组和染铅组。空白对照组给予蒸馏水，染铅组给予0.1％的醋酸铅水溶液染毒6周，建立铅中毒动物模型。然后再将染铅组小鼠随机分为10组，其中的8组参与正交设计，正交表采用L8(27)，8个组中第1组为单纯染铅组，其余的7个组分别为营养素联合干预组和DMSA与营养素联合干预组；剩余2组为DMSA阳性对照组(高剂量、低剂量)。 2.干预因素和方法干预因素包括DMSA、碳酸钙(Ca)、硫酸锌(Zn)、维生素C(VC)和维生素B1(VB1)；正交表的2个水平分别为给予或不给予。正交表中各因素的给予剂量分别为DMSA：50mg/Kg，Ca：400mg/Kg，Zn：25mg/Kg，VC：100mg/Kg，VB1：25mg/Kg；高剂量DMSA组和低剂量DMSA组给药剂量分别为100mg/Kg，50mg/Kg；DMSA与营养素均采用灌胃方式隔日给予，共干预3周。 3.测试指标与方法3.1体重和一般情况。 3.2血和脏器铅水平：原子吸收分光光度法。 3.3血红蛋白(hemoglobin，Hb)水平：氰化法。 3.4δ-氨基α酮戊二酸脱水酶(δ-amimolevulinicaciddehydratase，ALAD)活性：对二甲氨基苯甲醛比色法。 3.5谷胱甘肽(glutathione，GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase，GSH-Px)活性：5，5-二硫代2-硝基苯甲酸显色法。 3.6超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)活性：亚硝酸盐法。 3.7丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量：硫代巴比妥酸比色法。 3.8脏器蛋白含量：双缩脲法。 4.最佳治疗方案的确定根据干预后小鼠的血铅水平，对正交表的各受试因素进行方差分析，并比较其极差，结合各组小鼠血铅平均水平，筛选出最佳治疗方案。把筛选出的干预组小鼠体内的铅水平、血ALAD活性、Hb水平和一些抗氧化酶的活性，同高剂量DMSA组和低剂量DMSA组相比较，判断此种方案的治疗效果。 结果：1.体重与一般情况染毒期间染铅组和对照组体重增长情况无显著性差异，各染铅组小鼠的饮食、活动情况与对照组相比未见明显异常。 2.正交表的分析在正交表的各组中DMSA、Ca、VC联合干预组平均血铅水平最低，为234.7μg/L。DMSA与Ca、VC的两水平均值之差分别为584.3、49.9、161.1，对单个因素进行分析，只有因素DMSA有统计学意义(P＜0.01)。 3.最佳治疗方案疗效的检验DMSA、Ca、VC联合干预组小鼠血、骨、肝、和肾铅水平明显下降，与单纯染铅组相比有统计学差异(P＜0.01)。其中血铅水平在各干预组中降低最明显，不但明显低于低剂量DMSA组而且也明显低于高剂量DMSA组(P＜0.05)。比较小鼠脏器铅水平，从绝对值来看联合干预组均低于低剂量DMSA组，其中肝脏的铅水平出现统计学差异(P＜0.01)。观察全血ALAD活性的变化，单纯染铅组和各干预组与空白对照组比较均明显降低(P＜0.01)；其中联合治疗组和高剂量DMSA组ALAD活性高于单纯染铅组和低剂量DMSA组，差异显著(P＜0.05)。各组小鼠的Hb水平和抗氧化酶活性均未见有显著性差异。 结论：低剂量DMSA与Ca、VC联合应用时具有明显的驱铅效果，而且对铅致ALAD活性的抑制有一定保护作用。因此本研究认为，低剂量DMSA与Ca、VC联合应用为一种有效而可行的驱铅治疗方案。联合应用最突出的特点是可减少螯合剂DMSA的使用剂量，这样可能降低其毒副作用。这一研究结果将为进一步探讨儿童铅中毒的治疗提供科学依据。

目录

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中文论著摘要

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英文缩略语

前言

实验材料和方法

实验结果

讨 论

结 论

本研究创新性的自我评价

参考文献

综 述营养素干预儿童铅中毒的研究进展

在学期间科研成绩

致 谢

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