喉癌组织淋巴管生成，血管内皮生长因子C（VEGF-C）表达及颈淋巴结转移关系的研究

摘要

喉癌是头颈部一种常见的恶性肿瘤，在我国东北地区是高发区，且国内外资料表明近年来喉癌发病率有增长趋势。喉癌是一种主要经淋巴道转移的恶性肿瘤，癌细胞栓子通过淋巴系统转移至颈淋巴结是喉癌最常见的转移方式，具有很高的发病率。转移是影响喉癌患者预后的最重要因素，颈淋巴结的状态对喉癌患者的治愈率和生存率有很大影响，有颈淋巴结转移患者的5年生存率比无颈淋巴结转移者要低50％。但是，由于目前对喉癌转移的机制和规律的认识仍然不是十分明确，因此严重影响了对喉癌转移的控制而最终大大影响患者的生存质量和生存时间。因此，研究喉癌颈淋巴结转移的机制，判断喉癌的转移潜力，对于评价或估计喉癌患者的预后，针对性制定个体化治疗策略及进行抗肿瘤转移治疗的研究，最终提高喉癌患者的生存时间和生存质量都具有十分重要的意义。 肿瘤的生长和转移是一个复杂的多步骤的过程，受多种因素的影响。在肿瘤的转移过程中，脉管系统(血管和淋巴管)的作用不容忽视。要想形成一个转移灶，肿瘤细胞必须离开原发肿瘤灶进入淋巴循环或血液循环，避开宿主免疫系统的监控，才能在靶组织内“沉积”增殖、分裂生长而最终形成转移灶。血管和淋巴管是肿瘤细胞进入淋巴循环或血液循环的通道，血管受侵和淋巴管受侵是恶性肿瘤转移的最初过程，因此血管和淋巴管无疑在恶性肿瘤的转移过程中起着十分重要的作用。自从Folkman发现血管生成与肿瘤的生长和转移密切相关以来，近年来有关于血管生成的研究取得了很大进展，在对肺癌、前列腺癌、肝癌等恶性肿瘤的研究中相继发现肿瘤血管密度与肿瘤的侵袭转移和预后有密切关系。作为淋巴循环的通道，淋巴管无疑在恶性肿瘤的淋巴结转移过程中起着更加重要的作用，但是以往由于研究方法的限制，无法在光镜下确切区分血管和淋巴管，使得对于肿瘤淋巴管的研究，特别是淋巴管生成(lymphangiogenesis)与肿瘤转移的研究少有关注，远远落后于血管的研究。即便是目前已有的关于肿瘤淋巴管的研究也存在着争论，例如在癌内是否存在淋巴管及淋巴管生成的相对作用：是已经存在的癌旁淋巴管扩张对于肿瘤转移就已经足够，还是需要形成新的淋巴管以促进转移仍然未有定论。 很长一段时间以来人们假定认为淋巴道转移是一个被动的过程，但最近的研究认为，与肿瘤血管的改变是在促血管生成因子的作用下发生的一样，肿瘤细胞转移过程中发生的淋巴管改变也不仅仅是一个简单的机械过程，这种改变也是受调控因子影响的。随着第一个淋巴管特异性生长因子VEGF-C的发现，为深入研究肿瘤细胞经淋巴管转移至淋巴结的生理病理变化过程提供了一个可靠手段。1996年Joukov等报道了血管内皮细胞生长因子-C(vascularendothelialgrowthfactor-C，VEGF-C)，它是VEGF家族的新成员，与VEGF-A有同源性，但其主要作用于淋巴管内皮细胞，可以增强淋巴管内皮细胞的趋化性、促进淋巴管内皮细胞增殖和淋巴管的增生，包括管径的增大和数量的增加，因此被称之为淋巴管内皮细胞生长因子，是第一个被发现的淋巴管生长因子。近年来的研究发现VEGF-C在多种癌，如前列腺癌、结肠癌、乳腺癌、甲状腺癌、肺癌、口腔癌等组织中，其表达均明显高于正常组织，是原发灶肿瘤细胞和周围淋巴管内皮细胞之间相互旁分泌关系的重要调节因素，通过诱导淋巴管生成和扩张在肿瘤淋巴结转移过程中发挥着重要作用。VEGF-C的发现，为深入研究肿瘤细胞转移过程中淋巴管的变化提供了一个研究手段。 目前关于喉癌转移机制的研究多数集中于肿瘤细胞增殖侵袭能力、癌基因、抑癌基因等领域，而对转移通道的研究较少，这其中绝大多数的研究又集中于血管的研究，对于淋巴管的改变及淋巴管生长因子的研究甚少，系列研究更未见报道。5′—核苷酸酶—碱性磷酸酶(5′-Nase-ALPase)双重染色法的发现，使得可以在同一切片上同时显示并且区分淋巴管和血管，特异性强、准确性高，为在光镜下淋巴管的研究提供了依据和方法。为此，我们应用酶组织化学5′—核苷酸酶—碱性磷酸酶(5′-Nase-ALPase)双重染色方法显示并区分血管与淋巴管，同时研究喉癌癌内和癌旁区域的淋巴管的形态结构和分布，并应用图象分析仪对淋巴管密度进行定量研究；同时应用免疫组化技术和RT-PCR方法从翻译和转录两个水平分别检测淋巴管生长因子VEGF-C蛋白和mRNA的表达，探讨喉癌淋巴管生成、VEGF-C表达与临床病理因素，重点是与喉癌颈淋巴结转移的关系，力图揭示喉癌颈淋巴结转移的一部分机理。

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论文一喉癌组织中淋巴管生成及其与颈淋巴结转移关系的形态学定量研究

论文二血管内皮生长因子C(VEGF-C)蛋白在喉癌组织中的表达及其与淋巴管密度和颈淋巴结转移的关系

论文三血管内皮生长因子C(VEGF-C)mRNA在喉鳞癌中的表达及临床意义的研究

本研究创新性的自我评价

参考文献

综 述

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