百合鳞茎休眠进程中淀粉粒亚显微结构变化与酚类物质成分分析

摘要

为深入研究百合鳞茎休眠生理、为休眠机制研究提供理论依据，本试验在前期生理生化分析的基础上，利用扫描电子显微镜(Scan Electron Microscope，SEM)对兰州百合(Lilium davidii var．unicolor)发育和休眠过程中鳞片淀粉粒亚显微结构的变化进行了观察，并对低温贮藏期间百合鳞茎不同部位的酚类物质进行了定性与定量分析，以期明确与百合鳞茎休眠密切相关的淀粉及酚类物质的变化规律和相互关系。主要研究结果如下： 1．百合鳞茎发育进入休H民过程中，鳞片的淀粉粒数量与形念发生着明显变化，但依栽植种球的大小不同，其变化趋势存在差异。对小规格的栽植种球(平均重量7.5 g)而言，栽种期大维管束周围细胞中有少量淀粉粒游离在细胞腔内，并有絮状物存在。随着鳞茎的发育，淀粉粒数量显著增加，在植株半枯期达到最大，形状由纺锤形渐变为近圆形；处于大小维管束中心位置的细胞，其淀粉粒数量明显少于大维管束周围细胞中淀粉粒数量，并且在营养生长期和花蕾透色期，淀粉粒表面有裂纹存在。对于平均重量为29.2g的大种球而言，栽种期大维管束周围细胞内淀粉粒充满整个细胞腔，呈长椭圆形，体积较大，表明没有纹路；幼苗期至现蕾期淀粉粒数量逐渐下降，以大小淀粉粒结合的形态存在于细胞腔内；花蕾透色期至全枯期淀粉粒数量呈增加趋势。大小维管束中心细胞内的淀粉粒数量与变化趋势与大维管束周围细胞相比没有显著差异。 2．低温解除休眠过程中，鳞片内的淀粉粒数量呈递减趋势。大维管束周围的细胞中的淀粉粒数量在0～20 d变化不明显，贮藏后20～40 d数量逐渐减少，40～50 d内淀粉粒数量较少，变化幅度不大，而50～60 d淀粉粒的数量稍有回升。在同一取样时期，大小维管束中心细胞内淀粉粒数量的变化与大维管束周围细胞的变化情况基本一致。两个部位大多数的淀粉粒游离在细胞腔中，以与小颗粒结合的形式存在。同时发现在不同时期不同部位仍有絮状物存在。 3．建立了分离七种酚类物质的高效液相色谱条件。采用’Waters Nova-PakC18色谱柱(3.9 mmi.d.×150 mm，4μm)，柱温35℃，流动相为乙腈1％(V/V)乙酸水溶液(体积比为15：85)，流速1.0 ml/min，紫外检测波长280nm，进样量15 μl，可使七种酚类物质在20 min内达到完全分离。在上述优化条件下，对低温贮减期间百合鳞茎各个部位酚类物质的种类进行了鉴定，主要酚类物质包括：对羟基苯甲酸、阿魏酸、香豆酸、水杨酸、香豆素。顶芽是酚类物质分布最集中的部位。 4．对酚类物质含量的测定结果表明，鳞茎盘内的含量最高，顶芽次之，鳞片内的含量最低。其中对羟基苯甲酸的含量显著高于其它种类酚类物质的含量，最高可达(280.00±22.00)ug·g<'-1>FW，在不同贮藏时期、不同部位酚类物质的种类和含量存在差异。 5．外源施用实验表明：在100～500mg/ml浓度范围内，对羟基苯甲酸、阿魏酸、水杨酸和香豆素这四种酚类物质的浓度越高，鳞茎出苗时间越早。与对照相比，低浓度(100mg／m1)均可推迟出苗日期；而在较高浓度下(200 mg/ml和500 mg/ml)下出苗日期将提前。 6．香豆素三个浓度处理的出苗整齐度最好，百合种球出苗一致性增强，其中200mg/ml的出苗整齐度最高；阿魏酸出苗整齐度较差，对出苗日期的影响不大；对羟基苯甲酸和水杨酸低浓度处理(100mg/ml)对出苗整齐度的影响较小，而中等浓度(200mg/ml)的处理则可显著提高出苗一致性。

目录

声明

前言

第一章百合鳞茎休眠进程中淀粉粒亚显微结构变化

1.1材料与方法

1.1.1试验材料

1.1.2试验方法

1.2结果与分析

1.2.1.小鳞茎发育过程中鳞片细胞中淀粉粒亚显微结构变化

1.2.2低温贮藏期间鳞片细胞中淀粉粒亚显微结构变化

1.2.3大鳞茎发育过程中鳞片细胞中淀粉粒亚显微结构变化

1.3结论与讨论

1.3.1结论

1.3.2讨论

第二章低温贮藏过程中百合鳞茎内酚类物质高效液相色谱测定

2.1材料与方法

2.1.1试验材料

2.1.2仪器与试剂

2.1.3标准溶液的配制

2.1.4样品制备

2.2结果与分析

2.2.1酚类物质分离条件的研究

2.2.2标准曲线的制备

2.2.3样品中酚类物质测定

2.3结论与讨论

2.3.1结论

2.3.2讨论

第三章外源施用酚类物质对百合低温解除休眠的影响

3.1材料与方法

3.1.1试验材料

3.1.2测定项目及方法

3.2结果与分析

3.2.1不同种类和浓度酚类物质处理对百合鳞茎萌发的影响

3.2.2不同种类和浓度酚类物质处理对百合鳞茎出苗的影响

3.3结论与讨论

3.3.1结论

3.3.2讨论

参考文献

致谢

攻读硕士期间发表的学术论文