大鼠过敏性休克死后血清IgE、类胰蛋白酶的变化规律及法医学意义

摘要

目的：
　　 过敏性休克又名Ⅰ型超敏反应，其发病迅速，常危及生命，在医疗纠纷中常见，然而由于其缺少特异的病理形态学改变，是法医学鉴定的一大难题。因此，生化学指标作为过敏性休克的辅助诊断方法具有重要的法医学意义。本实验通过建立大鼠过敏性休克模型，观察IgE、类胰蛋白酶的死后生化学变化及其主要影响因素，为其客观应用提供理论依据。
　　 材料与方法：
　　 健康成年雄性Wistar大鼠48只，体重250～280g（由中国医科大学动物实验中心提供）。随机分为动物实验组（又分为室温组、冷藏组、冷冻组、对照组）、溶血组、样本保存组，其中实验组32只（均分为4组），溶血组及样本保存组均各8只。致敏大鼠每100g体重给予10mg卵蛋白（溶于0.5ml生理盐水，与佐剂1∶1等体积混合），分别于第1、3、5天腹腔注射给药，自首次给药后第18天，尾静脉注射卵蛋白（100mgOVA溶于1ml生理盐水中，不含佐剂），激发大鼠过敏性休克，观察反应，记录死亡时间。对照组分别给予生理盐水替代致敏原。甲苯胺蓝染色法观察肺脏组织肥大细胞脱颗粒。ELISA法检测样本中IgE、类胰蛋白酶水平。
　　 用SPSS17.0 for Windows软件统计分析，应用方差分析进行数据统计学处理，数据以均数±标准差（(x)±s）表示，组间比较用t检验， P＜0.05为差异有统计学意义。
　　 实验结果：
　　 实验组0h的大鼠血清IgE、类胰蛋白酶水平明显高于对照组;大鼠过敏性休克死亡后尸体室温、冷冻保存，采集血液样本，ELISA法检测IgE、类胰蛋白酶水平随死后经过时间(PMI)的不同有明显变化。尸体冷藏保存二者的血中浓度相对稳定;样本保存组，在室温、冷藏、冷冻条件下保存25天，血清样品中的IgE、类胰蛋白酶水平无明显变化。溶血组，IgE、类胰蛋白酶水平随血红蛋白含量的增多均呈升高趋势;实验结果还表明，室温及冷冻条件下保存尸体所导致的死后溶血是引起IgE、类胰蛋白酶检测水平升高的主要原因。
　　 结论：
　　 过敏性休克死亡大鼠血清IgE、类胰蛋白酶水平明显升高，可以作为过敏性休克死亡的辅助诊断指标，但其水平受PMI、尸体所处环境温度的影响较大，尤其是尸体长时间室温或冷冻保存所致溶血因素的影响，因此冷藏保存尸体或及时提取血液、分离血清是保证其客观科学应用于法医学实践工作中的必备条件。

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