As-gsk3β基因在中国卤虫早期胚胎发育和抗逆应答中的作用

摘要

糖原合成酶激酶3β（glycogen synthesis kinase3β，GSK3β）是一种CMGC家族的古老的多功能的丝氨酸/苏氨酸激酶。GSK3β在细胞代谢调节，细胞存活和胚胎发育过程中作为PI3K/AKT和Wnt信号通路的效应分子起这作用。中国卤虫在经历高盐或低温等不良环境时，会产生滞育卵，进入胚胎滞育过程，当遇到某种特定条件滞育又会终止。GSK3β在中国卤虫滞育终止和胚胎发育中的作用还是未知的。
　　在本研究中，我们获得了As-gsk3β的cDNA全长，为1801bp，共编码422个氨基酸。原位杂交实验结果显示As-gsk3β在中国卤虫身体各部分都有表达，表达没有组织特异性。尽管Real-time qPCR的实验结果显示As-gsk3βmRNA水平在发育到3天时有显著的增加，但是蛋白印迹实验结果显示As-GSK3β蛋白的表达量在不同发育阶段没有明显的变化。特别令人关注的是，As-GSK3β-Ser9p蛋白的表达水平在不同发育时期显示出显著不同。揭示As-GSK3β可能通过磷酸化丝氨酸9位点来调节并参与胚胎发育。中国卤虫海藻糖酶的表达模式可能和胚胎发育中海藻糖含量和糖原合成的变化相对应。As-GSK3β-Ser9p，As-GSK3ɑ-Ser21p和As-TREH表达的下调可能促进卤虫在高盐或低温条件下的存活。并且，As-GSK3β-Ser9p在5℃条件下表达增加可能会导致中国卤虫促存活机制的启动。总之，在中国卤虫早期胚胎发育，低温或高盐胁迫中，As-GSK3β和As-TREH相关蛋白表达水平的结果显示这些蛋白可能在糖原代谢调节、抗逆以及胚胎重启动发育过程起着重要作用。

目录

声明

1 绪论

1.1 中国卤虫及滞育

1.2 GSK3β的基因结构和相关功能

1.3 海藻糖酶相关功能介绍

1.4 本研究的目的和意义

2 材料与方法

2.1 材料

2.2 方法

3 结果

3.1 基因全长及信息学分析

3.2 As-gsk3β基因的表达模式

3.3 As-GSK3β，As-GSK3β-Ser9p，As-GSK3ɑ-Ser21p和As-TREH蛋白的表达模式

3.4 As-gsk3β的表达部位

4 讨论

4.1 中国卤虫As-gsk3β的基因全长及进化特征

4.2 As-GSK3β，As-GSK3β-Ser9p，As-GSK3ɑ-Ser21p和As-TREH在不同发育时期的表达水平

4.3 As-GSK3β，As-GSK3β-Ser9p，As-GSK3ɑ-Ser21p和As-TREH在不同盐度胁迫下的表达水平

4.4 As-GSK3β，As-GSK3β-Ser9p，As-GSK3ɑ-Ser21p和As-TREH在不同温度胁迫下的表达水平

4.5 As-gsk3β基因在中国卤虫不同发育阶段的表达部位

结论

参考文献

致谢