丹参酮Ⅱ-A对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖及p21表达的影响

摘要

目的：以胎牛血清（FBS）为基本营养，观察在有无血管紧张Ⅱ（AngⅡ）的条件下离体培养的大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖情况，再加入丹参酮Ⅱ-A（tanshinoneⅡ A，TSN），观察其对VSMCs的增殖的抑制程度，及有无明显的细胞凋亡出现，并检测细胞周期蛋白P21的表达情况，以探讨增值抑制可能的相关机制。 方法： （1）组织贴块法体外培养SD大鼠主动脉（胸、腹主动脉）VSMCs，利用传代后的4-6代细胞进行实验，实验开始前先使用免疫组化法鉴定培养的细胞是VSMCs，后将细胞在无FBS的DMEM培养基中培养48小时，使细胞同步化至G0期； （2）按实验分组干预细胞，具体分组为：空白对照组（DMEM培养基含5% FBS）；正常对照组（DMEM培养基中含5%FBS+1μmol/LAngⅡ）；实验组（DMEM培养基中含5%FBS+1μmol/LAngⅡ+不同浓度的TSN）； （3）使用MTT法检测TSN对VSMCs的细胞毒性，得出半数抑制率（IC50）及检测TSN对AngⅡ诱导的VSMC增殖的抑制； （4）在IC50附近选择TSN作用浓度，进行流式细胞仪检测VSMCs凋亡率，扫描电镜观察VSMCs凋亡时的形态； （5）使用RT-PCR检测p21的RNA表达，免疫组化法检测p21的蛋白表达。 结果： （1）丹参酮Ⅱ-A（TSN）在IC50范围内，具有抑制AngⅡ诱导的，离体培养的大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用，各浓度组与对照组间具有显著统计学差异（p<0.01），并且随浓度增加，抑制作用明显增强，浓度与抑制作用正相关。这种抑制作用有细胞周期蛋白p21的表达，并且这种表达呈现出浓度依赖性（p<0.05）。 （2）丹参酮Ⅱ-A（TSN）在IC50范围内，随着浓度的增加可出现与对照组有明显差异的细胞凋亡作用（p<0.05），并且出现细胞周期蛋白p21的表达。 结论： （1）TSN在IC50范围内可以明显的引起增殖的VSMCs的抑制，甚至出现凋亡。 （2）TSN在IC50范围内对VSMCs的抑制增殖和引起凋亡可能与细胞周期蛋白p21表达的增强有关。

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综述丹参酮Ⅱ-A对血管平滑肌细胞增殖的影响

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