血浆内皮素-1及血流变与原发性青光眼视功能损害相关性研究

摘要

目的：原发性青光眼(Primary glaucoma)是一组以损害视神经视觉功能为特征的临床症候群或眼病，严重危害着患者的视功能和生存质量，已经成为世界上第二大致盲眼病，其致盲性具有隐蔽性和不可逆性的特点，因此，明确原发性青光眼的发病机制对青光眼患者视功能保护的研究以及对防盲治盲工作具有深远意义。长期以来，在原发性青光眼发病机制及视神经损伤方面有两种学说，以眼压升高为主的机械学说和以营养视神经的血流变化为主的血管缺血学说。占主导地位的机械压迫学说认为眼压是视神经损伤的重要原因，在高眼压压迫的作用下，巩膜筛板向后方移位，延缓视神经内正常轴浆流的运输，导致视神经纤维的逐渐萎缩。然而，越来越多的实验研究结果提示，眼压升高不仅仅是引起青光眼视功能损害的唯一原因。本实验旨在探讨原发性青光眼患者血流变的指标变化及血浆中内皮素-1(entothelin-1 ET-1)水平的变化与视神经损害程度的相关性分析，以进一步推断其在青光眼视功能损害中的作用机制及意义。
　　 方法：选取2009年1月-2010年12月在大连医科大学附属第二医院确诊的原发性青光眼患者60例，药物控制眼压在21mm Hg以下，排除其他眼底疾病，依据视野结果以视野损伤较重眼作为研究对象按其视野检查结果中的平均缺损值(mean defect，MD)分为三个实验组：A组：轻度视神经损伤组，其中男7例，女13例，其中A1组为原发性开角型青光眼组10例，A2组为原发性闭角性青光眼组10例；B组：中度视神经损伤组，其中男10例，女10例，其中B1组为原发性开角型青光眼组10例，B2组为原发性闭角性青光眼组10例：C组：重度视神经损伤组，其中男9例，女11例，其中C1组为原发性开角型青光眼组10例，C2组为原发性闭角性青光眼组10例；选取同期确诊的老年性白内障患者20例作为对照组，其中男12例，女8例，对照组的筛选标准为：(1)排除青光眼病史；(2)眼压低于21mm Hg；(3)视野检查未见除白内障之外的其他眼部疾病的异常；(4)视乳头及视网膜神经纤维层排除其他眼底疾病。实验组及对照组所有受检对象均排除长期吸烟、大量饮酒、严重心脑血管疾病、肝脏疾病、肾脏疾病、血液病、糖尿病及长期服用抗凝类药物和活血化瘀类中药者。所有患者在视野检查前的24小时内停用一切影响瞳孔活动的药物，矫正受检者的屈光状态，向受检者讲解规范视野检查方法及注意事项，暗适应5分钟，对侧眼遮盖，距固视点3cm。对有可能存在因上睑下垂或上睑松弛遮盖影响视野检查结果的患者，使用胶布牵引固定上睑.为了排除由于患者对视野检查程序陌生而导致视野检查结果不可靠的影响，研究资料均采用第二次以上(包括第二次)的视野检查结果，并以单视野分析形势打印出结果，入组的视野结果必须满足视野检测固视丢失率(Fixation Losses)小于20％，假阳性率(False negative answer)小于30%。早晨7:00抽取患者空腹肘前静脉血7mL，其中5mL立即注入含有抗凝剂EDTA粉(1mg/ml血)的受血管中摇匀，于血样采集后2小时内使用全血自动血液流变动态分析仪检测流变各指标；其中2mL立即注入含10%依地酸二钠30ul和抑肽酶40ul的试管中摇匀。于室温下3000r/min离心10min，分离血浆放置-70℃低温保存，供测定ET-1用。测定方法：测定前使样本在室温或冷水中复融，再次4℃3000r/min离心5min取上清液，用放射酶联免疫法(radiation enzyme-linked immunosorbent assay，RELISA)测定ET-1，由同一位熟练操作者使用GC-2010γ放射免疫计数器，依据标准曲线直接计算ET-1。应用计算机SPSS17.0软件处理数据，对各组组间年龄、体重水平、ET-1水平、血流变各指标水平进行独立样本t检验分析；对各实验组组内的MD值与ET-1水平及全血粘度水平行Pearson线性相关分析。P＜0.05表示差异具有统计学意义。
　　 结果：(1)年龄及体重ABC三组与D组的差异不明显，P＞0.05，差异无统计学意义。(2)血浆中ET-1水平ABC三组均较D组高，P＜0.05，差异具有统计学意义。(3)血浆中ET-1水平A1组较A2组高，B1组较B2组高，C1组较C2组高，均为P＜0.05，差异具有统计学意义。(4)血流变各指标ABC三组均较D组高，P＜0.05，差异具有统计学意义。(5)血流变指标全血粘度A1组较A2组高，B1组较B2组高，C1组较C2组高，均为P＜0.05，差异具有统计学意义；全血粘度、纤维蛋白原、红细胞压积A1组与A2组，B1组与B2组，C1组与C2组，差异不明显，均为P＞0.05，差异无统计学意义。(6)ABC三组组内ET-1的含量与视野受损程度(MD值)存在相关关系，r=0.74，P＜0.05。(7)ABC三组组内全血粘度与视野受损程度(MD值)存在相关关系，r=0.62，P＜0.05。
　　 结论：1．原发性青光眼患者血浆ET-1明显高于对照组，推测其参与原发性青光眼患者血管功能失调过程，与视神经损害程度可能相关；2．血流变水平的改变影响视神经的血液供应，可能是原发性青光眼视神经损害的危险因素。