黄酮类化合物抗LDL氧化、下调LOX-1表达、抑制肝癌细胞增殖及构效关系研究

摘要

目的:黄酮类化合物是一种天然多酚类植物化学物，具有潜在的治疗癌症、抗炎症、抗自由基、抗氧化、抗病毒、抑制血小板聚集、调节血压和血糖、防治心脑血管疾病等多种生物学活性。其生物学活性依赖于本身内在的分子结构。本文系统研究了八种黄酮类化合物槲皮素、异槲皮素、芦丁、橙皮素、橙皮苷、柚皮素、柚皮苷和淫羊藿苷在抗LDL氧化、调控LDL特异性受体LOX-1表达和抑制肝癌细胞增殖方面的作用并探讨其构效关系。
　　 方法:采用高效液相色谱法检测八种黄酮类化合物的纯度;采用体外实验方法，测定八种黄酮类化合物对Cu2+介导的LDL氧化修饰的影响;通过人脐静脉内皮细胞HUVECs与dil-ox-LDL结合情况，采用免疫荧光法检测黄酮类化合物对LOX-1表达的影响;MTT法和流式细胞术检测八种黄酮类化合物对人肝癌细胞株HepG-2增殖和凋亡的影响。
　　 结果:
　　 1.八种黄酮类化合物纯度均大于95％。
　　 2.八种黄酮类化合物对Cu2+诱导的LDL体外氧化均呈现抑制作用，其氧化抑制作用大小为:槲皮素（59.56±7.03％）＞异槲皮素（55.17±4.65％）＞芦丁(46.53±2.09％)＞橙皮素＞（22.67±1.68％）柚皮素（15.7±2.43％）＞橙皮苷(11.44±2.09％)＞柚皮苷(5.55％)＞淫羊藿苷(3.53±3.20％)。
　　 3.八种黄酮类化合物均能抑制ox-LDL诱导的内皮细胞LOX-1受体上调，并呈剂量依赖性。抑制率大小为:淫羊藿苷＞槲皮素＞柚皮素＞柚皮苷＞异槲皮素＞橙皮素＞橙皮苷＞芦丁。
　　 4.八种黄酮类化合物均能抑制HepG-2细胞增殖，并呈浓度-时间效应依赖性。抑制率排序为:橙皮素＞槲皮素＞淫羊藿苷＞柚皮素＞橙皮苷＞异槲皮素＞芦丁＞柚皮苷。
　　 结论:
　　 1.黄酮类化合物-OH数目越多，抗氧化性越强;C3、7-OH和C3，、4，邻二羟基是抗LDL氧化的重要基团;糖基取代减弱其抗氧化性;C2=C3和C4位羰基也是维持抗氧化活性的重要特征;甲氧基和异戊二烯基引入会使抗氧化活性降低。
　　 2.黄酮类化合物C3-OH、C3'、4'邻二羟基、C5、7间二羟基和异戊二烯基是抑制LOX-1受体表达上调的关键基团;-OH成苷，且糖基越大，抑制作用越弱，甲氧基引入，化合物抑制作用减弱。
　　 3.黄酮类化合物C3、7-OH、C4'-OCH3和C8位异戊二烯基是抑制HepG-2细胞增殖的有利功能团;糖基取代减弱其抑制细胞增殖效应。

目录

声明

摘要

前言

材料和方法

一．实验材料

二．方法

结果

1．八种黄酮类化合物纯度分析

2．八种黄酮类化合物抗LDL体外氧化

3．八种黄酮类化合物下调LOX-1受体表达

4．八种黄酮类化合物抑制HepG-2细胞增殖实验

讨论

1．八种黄酮类化合物抗LDL氧化

2．八种黄酮类化合物调控LOX-1受体表达

3．八种黄酮类化合物抑制HepG-2细胞增殖

结论

参考文献

综述

附录

致谢