纳米银/脱细胞真皮基质的制备及抗菌性能评价

摘要

[目的]1.探究纳米银溶液的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度，进而对纳米银的抗菌性能进行评价;2.将脱细胞真皮基质与纳米银结合，制作一种兼具抗感染作用和促进创面组织再生作用的生物敷料。3.体外实验评价纳米银/脱细胞真皮基质的抗菌杀菌效果。4.体外实验评价纳米银/脱细胞真皮基质中银的缓释性能，评价纳米银/脱细胞真皮基质的抗菌杀菌效果的持久性。5.探究一种简单可靠的动物烫伤模型，对不同深度的烫伤模型实验条件进行探索。6.制作大鼠深Ⅱ°烫伤后感染动物模型，评价纳米银/脱细胞真皮基质的抗感染和促进愈合的综合作用。
　　 [方法]1.通过倍比稀释法和基内接种法，测定了纳米银溶液对于金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度。2.通过浸渍吸附法将纳米银与脱细胞真皮基质结合，制备纳米银/脱细胞真皮基质。3.通过Kirby-Baucer抑菌环法比较不同浓度浸渍的脱细胞真皮基质的抑菌效果，进而评价纳米银/脱细胞真皮基质的体外抗菌效果。4.通过血浆浸渍法模仿创面渗出，检测浸渍不同时间后的纳米银/脱细胞真皮基质及血浆中纳米银含量，同时对浸渍后的纳米银/脱细胞真皮基质进行Kirby-Baucer抑菌环实验，评价其缓释性能。5.通过砝码烫伤法探究大鼠不同深度烫伤的实验条件，病理切片证实90℃烫伤15s可造成大鼠深Ⅱ°烫伤。应用创面定量涂菌法制备大鼠深Ⅱ°烫伤后创面感染动物模型，通过分组使用“医用纱布”、“爱可欣”、“脱细胞真皮基质”、“纳米银/脱细胞真皮基质”，观察使用不同敷料换药创面痂下细菌计数、创面愈合率、愈合等级、愈合天数四个指标，进一步评价了纳米银/脱细胞真皮基质的临床抗感染和促进创面愈合效果。
　　 [结果]1.纳米银溶液对于金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度均为为8mg/L;纳米银溶液对于金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的最低杀菌浓度分别为64mg/L和32mg/L;纳米银对于铜绿假单胞菌的杀菌效果可能优于金黄色葡萄球菌。2.浸渍纳米银溶液48h后制备出纳米银/脱细胞真皮基质敷料，保留了脱细胞真皮基质的柔软和弹性，电镜观察其表面和内部均匀分布有大小均一的纳米银颗粒。3.相同的浸渍时间内，随着浸渍纳米银浓度的升高，所得的纳米银脱细胞真皮基质的抑菌环逐渐增大:对于铜绿假单胞菌组，当浸渍浓度为7.8125mg/L及更高浓度组时纳米银脱细胞真皮基质组的抑菌环直径将大于爱可欣组的抑菌环直径，即抑菌效果优于爱可欣;对于金黄色葡萄球菌，当浸渍浓度为15.625mg/L及更高浓度时纳米银脱细胞真皮基质组的抑菌环直径将大于爱可欣组的抑菌环直径，即抑菌效果优于爱可欣。4.爱可欣及纳米银/脱细胞真皮基质均能快速释放纳米银，且纳米银/脱细胞真皮基质释放速度快于爱可欣，浸渍5天后仍有较快的释放速度。5.对于金黄色葡萄球菌组，纳米银/脱细胞真皮基质血浆中浸渍天数≤3天时，抗菌效果不逊于爱可欣;对于铜绿假单胞菌组，纳米银/脱细胞真皮基质血浆中浸渍天数≤5天时，抗菌效果仍不逊于爱可欣。6.通过砝码烫伤制作出稳定的大鼠烫伤模型:60℃(5s)、60℃(15s)、70℃(10s)、80℃(15s)、90℃(15s)、100℃(15s)对应大鼠Ⅰ°、浅Ⅱ°、浅Ⅱ°、偏浅深Ⅱ°、偏深深Ⅱ°、Ⅲ°创面。7.制备出大鼠深Ⅱ°烫伤伴感染模型，纳米银/脱细胞真皮基质在创面痂下细菌计数、创面愈合率、愈合等级、愈合天数四个指标中均优于爱可欣、脱细胞真皮基质、医用纱布，进一步验证了纳米银/脱细胞真皮基质的临床抗感染和促进创面愈合效果。
　　 [结论]1.纳米银具有良好的抗菌作用。2.浸渍吸附法可用于制备纳米银/脱细胞真皮基质。3.纳米银/脱细胞真皮基质具有持久的抗感染作用。4.用200g砝码90℃预热15s可制作出深Ⅱ°大鼠烫伤模型。5.纳米银/脱细胞真皮基质兼具抗感染作用和促进创面愈合作用。

目录

声明

摘要

前言

第一部分 纳米银溶液及纳米银／脱细胞真皮基质的体外实验研究

材料和方法

1．材料

2．方法

结果

1 倍比稀释法测定纳米银溶液的最低抑菌浓度

2 基内接种法测定纳米银溶液最低杀菌浓度

3 脱细胞真皮基质和纳米银／脱细胞真皮基质样品的外观

4 不同浸渍浓度的纳米银／脱细胞真皮基质与爱可欣抗菌效果对比结果

5 纳米银／脱细胞真皮基质缓释性能评价实验结果

讨论

1 倍比稀释法测定纳米银溶液的最低抑菌浓度与基内接种法测定纳米银溶液最低杀菌浓度

2 纳米银／脱细胞真皮基质制备

3 不同浸渍浓度的纳米银／脱细胞真皮基质与爱可欣抗菌效果对比实验

4 纳米银／脱细胞真皮基质缓释性能评价

(五)总结

第二部分 纳米银／脱细胞真皮基质的动物实验研究

材料和方法

1 材料

2 方法

结果

1 大鼠烫伤模型的建立

2 纳米银／脱细胞真皮基质在大鼠深Ⅱ°烫伤感染模型中的应用比较实验

讨论

1、大鼠烫伤模型的建立

2 纳米银／脱细胞真皮基质在大鼠深Ⅱ°烫伤感染模型中的应用比较实验

(五)总结

结论

参考文献

综述

致谢