聚己内酯—壳聚糖静电纺丝纳米纤维支架与聚乳酸—羟基乙酸—壳聚糖静电纺丝纳米纤维支架同雪旺细胞的生物相容性研究

摘要

本研究分为二部分：
　　第一部分：FK506-壳聚糖神经导管治疗正中神经缺损的研究
　　目的：通过应用FK506-壳聚糖神经导管治疗正中神经缺损，验证该产品的安全性以及预后疗效。
　　方法：将2010年1月至2013年1月大连医科大学附属一院手显微外科急诊平诊9例中正神经损伤的患者应用FK506-壳聚糖神经导管进行手术治疗，手术指征包括发生正中神经完全离断，缺损程度在10mm-30mm的患者。术后随访3个月至18个月。记录受手术运动感觉开始恢复时间以及创口愈合等级;BMRC运动感觉评价;两点辨别觉以及手部肌肉形态。
　　结果：应用FK506-壳聚糖神经导管术后创口Ⅰ/甲级愈合，局部无过敏以及炎症反应;运动感觉开始恢复时间均为4周左右。术后随访BMRC优良率为77.78％，其中优5例，良2例，可2例。两点辨别觉＞5mm的患者占77.78％。术后大鱼际肌均无明显萎缩。
　　结论：FK506-壳聚糖神经导管安全无毒，应用FK506-壳聚糖神经导管手术治疗正中神经10mm-30mm缺损，术后患肢的运动和感觉功能的恢复取得令人满意的效果。
　　第二部分：聚己内酯-壳聚糖静电纺丝纳米纤维支架与聚乳酸-羟基乙酸-壳聚糖静电纺丝纳米纤维支架同雪旺细胞的生物相容性研究
　　背景：随着神经组织工程的发展，具有优秀生物相容性和降解性的混纺生物支架材料接种种子细胞修复神经缺损成为研究热点。静电纺丝技术制备的混纺支架材料，孔隙率高，比表面积大，不仅克服了单一支架材料的机械强度低、亲水性差、降解速度不易调控的缺点，还提高了与种子细胞的亲和力。
　　目的：利用静电纺丝技术制备纳米级聚己内酯-壳聚糖(PCL/CS)与聚乳酸-羟基乙酸-壳聚糖(PLGA/CS)两种共聚支架材料，分析力学强度、孔隙率以及亲水性，研究其与雪旺细胞(Schwanncell，SC)在体外共培养的生物相容性并进行比较。
　　方法：1、静电纺丝技术制备两种混纺支架材料；2、体外分离培养雪旺细胞；3、观察并鉴定雪旺细胞；4、雪旺细胞在两种支架材料上体外共培养后，观察细胞生长和分布情况；5、cck-8方法测定雪旺细胞与各浓度支架材料浸提液中随时间变化的吸光度(OD)值，检测支架材料毒性；6、流式细胞术FITC-AnnexinV/PI检测两种支架材料上雪旺细胞凋亡率；7、测定雪旺细胞与两种支架材料的细胞粘附率；8、cck-8方法测定与两种支架材料共培养的雪旺细胞的增殖率。
　　结果：1、静电纺丝方法成功制备PCL/CS与PLGA/CS两种孔隙率高、亲水性良好、力学强度强的两种共聚支架材料；2、成功地分离培养出增殖状态的纯净雪旺细胞；3、雪旺细胞在两种共聚支架材料成簇有一定方向的生长，生长状态良好，在支架材料上充分伸展，与纺丝相融合；4、经cck-8检测，雪旺细胞在不同浓度实验组及对照组浸提液中生长良好，第5天为对数生长期，OD值均随时间延长增大，同组间各时间点比较，统计学差异显著(p<0.05)；同实验组各浓度、各时间点比较，无显著差异(p>0.05)；两种支架材料均无毒性；5、经FITC-AnnexinV/PI检测，两实验组与对照组凋亡率均<10%，无显著差异(p>0.05)；6、PLGA/CS组与雪旺细胞的粘附率高于PCL/CS与对照组，差异显著(p<0.05)；PCL/CS组与对照组无明显差异(p>0.05)；7、雪旺细胞在PLGA/CS组的增殖率(129.09%)高于PCL/CS(101.41%)，统计学差异显著(p<0.05)；PCL/CS组与对照组无明显差异(p>0.05)。
　　结论：静电纺丝制备的PCL/CS与PLGA/CS两种共聚支架材料，均有的良好力学强度、亲水性以及孔隙率，安全无毒，且均能为雪旺细胞的粘附增殖提供了理想的三维生长环境，具有优秀的生物相容性；雪旺细胞在PLGA/CS纳米纤维支架上的细胞粘附率与增殖率优于PCL/CS纳米纤维支架。

目录

声明

FK506-壳聚糖神经导管治疗正中神经缺损的研究

摘要

前言

资料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

聚己内酯-壳聚糖静电纺丝纳米纤维支架与聚乳酸-羟基乙酸-壳聚糖静电纺丝纳米纤维支架同雪旺细胞的生物相容性研究

摘要

前言

1 材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述 神经导管修复神经缺损的发展

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