索拉非尼耐药肾癌细胞系的建立及索拉非尼治疗晚期肾癌耐药情况的临床调查

摘要

目的:目前，虽然以索拉非尼为代表的分子靶向化疗药物的面世为肾癌晚期患者的治疗带来了新的希望，但是有一部分患者进行靶向治疗初始即对药物耐药，或者即使最初有效的患者在治疗一段时间后也逐渐产生继发性耐药，严重的影响了靶向化疗药物的疗效。鉴于此，本课题设计实验建立耐索拉非尼肾癌细胞系，以求进一步探究其耐药机制，指导临床用药，延长患者的生命。并回顾性研究我院索拉非尼治疗晚期肾癌患者的临床资料，分析其耐药情况的现状及可能的耐药原因。
　　方法:实验研究:建立耐索拉非尼肾癌细胞系的相关研究。将人肾透明细胞癌786-O细胞系分为A、B两组，A组只以含10％胎牛血清的1640培养基培养，B组在含10％胎牛血清的1640培养基中加入索拉非尼0.01μmol/L培养，两组均置于5％CO2的37℃孵育箱中培养，多次传代后用MTT法测得两组IC50值，按公式计算耐药倍数。耐药倍数大于25则耐药细胞系建立成功。
　　临床调查:回顾分析我院2007年10月-2013年10月95例晚期肾癌进行索拉非尼治疗的患者，并获得完整随访的临床及病理资料，95例患者中男性患者74例，女性患者21例，平均年龄61岁（中位数60岁;范围为27-85岁），95例患者中86例为透明细胞癌，1例为嫌色细胞癌，乳头状细胞癌2例，透明细胞癌合并嫌色细胞癌1例，病理类型未明5例。对全部病例进行随访，平均生存时间26个月（中位数为20个月;范围为3-81个月）。其中耐药人数17人，约占18％，其平均生存时间约16个月，非耐药患者78人，平均生存时间约28个月。通过对其临床资料、病理资料以及长期随访资料的分析，分析产生耐药的原因并利用Kaplan-Meier生存函数，比较两组患者总生存期有无差异。
　　结果:实验研究:用MTT法于波长490nm处测得敏感及耐药两组OD值，经过计算得出两组IC50值分别为敏感组0.009μmol/L，耐药组0.289μmol/L。代入公式算得耐药倍数约为32.11。耐药倍数大于25，耐药细胞系建立成功。
　　临床调查:本次调查的95例患者平均生存时间26个月，其中耐药人数17人，约占18％，其平均生存时间约16个月。其中初始即发生耐药患者4人，约占耐药组人数的24％（约占患者总数的4％），继发耐药患者13人，约占耐药组人数的76％（约占患者总数的14％）;非耐药患者78人，平均生存时间约28个月。两者的总生存时长经检验P=0.002，其差异有统计学意义。耐药的产生与年龄(P=0.318)，性别(P=0.075)均无统计学意义。
　　结论:实验测得耐药细胞IC50值约为0.289μmol/L，敏感细胞IC50值约为0.009μmol/L，耐药倍数约为32.11，耐药细胞系培养成功。
　　索拉非尼治疗晚期肾癌存在相当比例的耐药性，且耐药组患者总生存期与非耐药组患者存在明显差异。耐药的发生与患者的年龄、性别、有无症状、原发肿瘤大小、疾病分期、病理类型均无关，其原因还有待于进一步探究。

目录

声明

摘要

前言

第一部分 建立耐索拉非尼肾癌细胞系

材料与方法

一、材料与仪器

二、实验方法

结果

第二部分 索拉非尼临床耐药性调查

资料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述 索拉非尼治疗晚期肾癌耐药机制的研究进展

致谢