Jak2-STAT3信号通路在大鼠根尖周炎中表达的相关性研究

摘要

目的:建立实验性大鼠根尖周炎模型，检测在大鼠根尖周炎模型中Janus蛋白激酶2(Jak2)和信号传导及转录激活因子3(Stat3)的相关表达。
　　方法:选择25只8周龄大小的SD大鼠，随即分成A、B两组，A组20只，B组5只，A组于右侧下颌第一磨牙开髓，封入PBS缓冲液小棉球，玻璃离子封洞，调合。A组大鼠分别于7、14、21、28天处死，B组大鼠不做任何处理于28天处死作对照组。所有大鼠取右侧下颌骨，剥离软组织，脱钙后进行HE染色观察根尖周病理变化;使用Jak2、Stat3、p-Jak2、p-Stat3多克隆抗体进行免疫组织化学染色，检测Jak2、Stat3、p-Jak2、p-Stat3在根尖周的表达和分布;采用酶组织化学染色方法对破骨细胞进行检测。
　　结果:1.HE染色:
　　A组大鼠术后7天，根尖周附近出现少量炎症细胞;术后14天，根管内牙髓坏死，根尖周大量炎症细胞浸润，炎症进入急性期;术后第21天，根尖周附近淋巴细胞增多，牙槽骨出现吸收;术后第28天，淋巴细胞浸润继续增多，根尖周牙槽骨附近出现Howship陷窝。对照组大鼠无根尖周病理改变。
　　2.免疫组织化学染色:
　　(1)术后第7天，根尖周附近有少量Jak2阳性细胞;第14天，阳性细胞增多，达到顶峰，高于其他时间点;21天时，阳性表达开始下降;第28天时，阳性表达继续下降。正常对照组可见少量Jak2阳性表达细胞。实验组各时间点阳性表达数均高于对照组，结果具有统计学差异(P＜0.05)。
　　(2)术后第7天，根尖周区域出现Stat3阳性细胞;第14天，阳性表达数剧增，达到峰值;第21天，其阳性表达开始下降;第28天，表达量继续减少，与对照组相近(P＞0.05)。其余时间点与对照组均有统计学差异(P＜0.05)。正常组可见少量STAT3阳性细胞。
　　(3)术后7-14天，根尖周区域p-Jak2阳性细胞逐渐增多，在14天达到最大值;第21天，其表达明显减少;第28天，p-Jak2表达继续减少，与对照组无统计学差异(P＞0.05)。除第28天外，其余时间点与对照组均有统计学差异(P＜0.05)。正常对照组偶见p-Jak2表达。
　　(4)术后第7天，根尖周炎症浸润区p-Stat3阳性表达细胞增多;第14天，其表达量达到峰值，高于其他时间点;术后第21天，p-Stat3阳性表达减少;第28天时继续下降，表达量与对照组无统计学差异(P＞0.05)。其余各时间点均与对照组有统计学差异(P＜0.05)。正常对照组偶见p-Stat3阳性细胞。
　　3.酶组织化学染色
　　右侧下颌第一磨牙根尖处可见大量TRAP染色阳性的破骨细胞。术后第7天，牙槽骨吸收区域可见少量破骨细胞表达;第14天，TRAP染色阳性破骨细胞增多，达到顶峰;第21天，其表达开始下降;第28天，破骨细胞表达继续下降，与第7天无统计学差异(P＞0.05)，其余各时间点之间均有统计学差异(P＜0.05)。正常组织根尖处少见破骨细胞表达。
　　结论:Jak2和Stat3在根尖周炎的形成过程中表达量较高，以及其在病理过程中与破骨细胞产生的趋势有相关性，可推测其参与了根尖周炎的病理过程以及周围骨组织的吸收。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

1．实验材料

1．1 主要实验试剂及仪器

2．实验方法

2．1 实验分组

2．2 大鼠根尖周炎模型的建立

2．3 大鼠根尖周炎组织标本的制备

2．4 脱钙

2．5 包埋

2．6 切片制备

2．7 HE染色

2．8 免疫组织化学染色

2．9 酶组织化学染色

3．细胞计数

4．统计分析

实验结果

1．HE染色根尖周病理变化

2．免疫组织化学染色观察Jak2在大鼠根尖周炎中的分布和表达

3．免疫组织化学染色观察Stat3在大鼠根尖周炎中的分布和表达

4．免疫组织化学染色观察p-Jak2在大鼠根尖周炎中的分布和表达

5．免疫组织化学染色观察p-Stat3在大鼠根尖周炎中的分布和表达

6．酶组织化学染色观察大鼠根尖周破骨细胞的数量和分布(TRAP-抗酒石酸酸性磷酸酶)

7．统计学分析

讨论

结论

参考文献

综述 JAK-STAT通路转导过程以及在各类疾病中的作用

致谢