抗癌药物芫花酯甲PLGA微球制备与肺靶向性评价

摘要

芫花酯甲是从中国特有的瑞香科植物芫花中分离得到的瑞香烷型二萜原酸酯类化合物，对多种细胞系均具有较强的抗癌活性，尤其对人肺癌A549细胞(IC<,50> 0.15μM)。属于新结构类型的DNA拓扑异构酶Ⅰ(topo Ⅰ)抑制剂。本研究制备了芫花酯甲PLGA微球，并对其肺靶向性进行了初步研究。 本文选择生物可降解的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(dl-lactide-co-glycolide，PLGA，50：50)为载体材料，用溶剂挥发-萃取法制备芫花酯甲PLGA微球，用正交实验优化了制备方法。电镜扫描结果显示微球外观良好。由离心粒度分布仪测得平均粒径为9.0μm，5-20μm占总数的86.3％，载药量为17.0％，包封率为91.5％。体外药物释放曲线符合Higuchi方程，为扩散模式，y％=22.334+5.802t<'1/2>(r=0.9942，n=10)。0.5h药物突释量为27.2％，随着PLGA的溶胀和逐步降解，药物扩散到释放介质中，第1天累计释放量达到47.3％，第5天达83.6％。 本文首次采用一种脂溶性螺吡哺类光致变色荧光染料标记PLGA微球，用荧光显微镜观察各组织切片中微球的个数进行靶向性评价。小鼠静脉注射结果显示，5-20μm微球在肺部的分仃量在给约后6h达到最大值，而<5μm和>20μm的微球组对肺部没有明显选择性，表明粒径大小是影响靶向性的主要因素。小鼠和家兔静脉注射5-20μm微球6h后各组织切片均显示此制剂有良好的肺靶向特征，约80％的微球分御于肺部。小鼠和家兔的测试结果基本一致，表明此微球的靶向特征没有明显的生物物种差异性。根据HPLC弘测定结果，芫花酯甲PLGA微球静脉注射家兔6h后肺部相对浓度为81.8％。相对血，肿摄取率为16.7倍，肝为2倍，脾、肾和心约为0.2-0.3倍。HPLC法验证了荧光微球表征法的科学性和准确性，两种方法检测结果基本一致。荧光微球表征法具有操作简便、图象清晰、结果直观等特点，解决了微球研究中影象学评价的难题，为微球的靶向性研究提供了一种全新的研究思路。

目录

文摘

英文文摘

声明

引 言

第一章概述

1.1癌症现状

1.2肿瘤靶向制剂

1.2.1被动靶向制剂

1.2.2主动靶向制剂

1.2.3物理化学靶向制剂

1.2.4其它靶向治疗

1.3微球制剂

1.3.1微球特性

1.3.2载体材料

1.3.3制备方法

1.3.4生物靶向性评价

1.4微球制剂商品化现状

1.5肺靶向微球研究进展

1.6立题依据及意义

第二章处方设计与制备方法

2.1试验材料

2.1.1主要试剂

2.1.2主要仪器

2.2试验方法

2.3结果与讨论

2.3.1单因素考察

2.3.2 正交试验结果

2.3.3重现性考察

2.3.4芫花酯甲PLGA微球

2.3.5荧光标记芫花酯甲PLGA微球

2.4小结

第三章微球的性能表征

3.1试验材料

3.1.1主要试剂

3.1.2主要仪器

3.2试验方法

3.2.1表面性能表征

3.2.2粒度分布测定

3.2.3热性能测试

3.2.4标准曲线建立

3.2.5载药量与包封率测量

3.2.6体外释放度测定

3.3结果与分析

3.3.1表面形态

3.3.2粒径分布

3.3.3热性能分析

3.3.4标准曲线

3.3.5载药量与包封率

3.3.6体外药物释放结果

3.4小结

第四章体内分布与靶向性评价

4.1试验材料

4.1.1主要试剂

4.1.2主要仪器

4.1.3实验动物

4.2试验方法

4.2.1药品溶液的配制

4.2.2给药时间对靶向性的影响

4.2.3粒径大小对靶向性的影响

4.2.4荧光标记微球在小鼠和家兔体内分布的影像学表征

4.3结果与讨论

4.3.1荧光染料的选择

4.3.2给药时间与组织分布

4.3.3粒径大小对靶向性的影响

4.3.4荧光标记微球的靶向性评价

4.4小结

第五章HPLC法对荧光微球表征法的验证

5.1实验材料

5.1.1主要试剂

5.1.2主要仪器

5.1.3实验动物

5.2实验方法

5.2.1药品溶液的配制

5.2.2血清及组织中芫花酯甲含量测定方法的建立

5.2.3 HPLC-UV法测定芫花酯甲微球家兔体内分布

5.3实验结果

5.3.1芫花酯甲测定方法

5.3.2 HPLC-UV法对荧光微球表征法的验证

5.4小结

结 论

展 望

参考文献

攻读硕士学位期间发表学术论文情况

致 谢