同工酶技术在粉螨分类中的应用（蜱螨亚纲：粉螨总科）

摘要

本文以五种粉螨为实验材料，辅以普通肉食螨和桔全爪螨为对比，采用垂直板型聚丙烯酰胺凝胶电泳法，对常见同工酶EST、MDH、AMY、ADH、CAT等进行比较研究。实验探讨了粉螨不同样品匀浆液同工酶比较、不同样品浓度同工酶比较、不同饥饿状况下粉螨同工酶比较、不同种类粉螨同工酶比较、同种粉螨不同发育时期同工酶比较、不同地域粉螨同工酶比较。实验结果表明：使用pH7.4的0.01M的磷酸缓冲液制备样品实验效果最佳；粉螨取样时，通常采用样品与匀浆液体积比1：10浓度配比，低于此浓度则容易造成酶带缺失；粉螨制样时，饥饿对实验效果影响不明显，通常无须饥饿处理样品；不同种类间的粉螨酶带具有多样性，存在不同程度的相似相异性，为粉螨的分类鉴定提供了新的证据，EST-21，MDH-7，8，9，10，12，13，18是粉螨总科的特征谱带，控制着其特有的性状，粉螨科中的腐食酪螨与奥氏嗜木螨、椭圆食粉螨亲缘关系较奥氏嗜木螨与椭圆食粉螨间的更近，推测奥氏嗜木螨与椭圆食粉螨是由食酪螨属分化出来的，CAT酶谱反映了四种粉螨的耐药性的差异，AMY酶谱清晰度不够，分离不甚理想，科属种间的差异以及遗传距离与形态分类基本吻合；同种粉螨不同时期的同工酶酶带基本相同，为此种粉螨的特征谱带，但各酶带活性各有不同，同时也有部分酶带是各个时期所独有的，表明采用幼螨进行种类鉴定的可行性，为分析各发育阶段生理差异提供了依据；不同地域粉螨酶谱没有出现明显的差异。

目录

文摘

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1、前言

1.1课题的提出

1.2同工酶技术在昆虫分类学上的应用

1.3同工酶技术在螨类分类学上的应用

1.3.1同工酶在螨类分类和物种鉴定中的研究

1.3.2同工酶在螨类亲缘关系鉴定和遗传进化中的研究

1.3.3同工酶在螨类个体发育和滞育中的研究

1.3.4同工酶在螨类抗性中的研究

1.3.5同工酶在螨类基因座位多态性中的研究

1.3.6同工酶在螨类区域性和生物指示中的研究

1.4课题研究的目的、意义和研究内容

2、材料与方法

2.1实验材料

2.2实验方法

2.2.1 PAGE的基本原理

2.2.2仪器和试剂

2.2.3实验步骤

2.2.4粉螨各种同工酶制胶及染色方法

3、实验结果与分析

3.1不同匀浆缓冲液的同工酶比较研究

3.2样品浓度的确定

3.3材料饥饿的处理

3.4同工酶与粉螨种类的鉴定

3.4.1七种螨酯酶同工酶比较研究

3.4.2七种粉螨苹果酸脱氢酶同工酶（MDH）比较研究

3.4.3四种粉螨过氧化氢酶(CAT)比较研究

3.4.4四种粉螨淀粉酶(AMY)比较研究

3.4.5四种粉螨乙醇脱氢酶(ADH)比较研究

3.5粉螨不同虫态同工酶比较

3.5.1椭圆食粉螨各虫态同工酶比较

3.5.2腐食酪螨各虫态同工酶研究

3.6不同地域粉螨同工酶比较研究

4、小结与讨论

5、参考文献

6、致谢