目的：研究心肌营养素-1(cardiotrophin-1，CT-1)在高静水压促心肌成纤维细胞增殖中的作用，阐明CT-1促心肌成纤维细胞增殖的信号通路以及CT-1调节心肌成纤维细胞增殖与促凋亡基因Bad、分化抑制基因Id3的关系。 方法：消化、差速贴壁法原代培养心肌成纤维细胞，3-4代细胞用于实验，倒置显微镜下观察细胞形态，抗纤维连接蛋白抗体免疫细胞化学染色进行细胞鉴定。利用自制周期性压力培养装置模拟体内高血压，对心肌成纤维细胞进行处理，随机分为：(1)对照组，(2)压力组，(3)压力+CT-l反义寡核苷酸组，(4)压力+CT-1正义寡核苷酸组，(5)压力+Jak／STAT3阻断剂(AG490)组，后四组进行160mmHg压力培养8小时，采用MTT法检测细胞增殖，RT-PCR(包括细胞裂解、总RNA的提取、逆转录、PCR)测细胞内信号通路STAT<,3>mRNA及凋亡基因BadmRNA、分化抑制基因Id<,3>mRNA的表达，用Western-blotting检测CT-1的蛋白表达。 结果：(1)与对照组相比，压力刺激组心肌成纤维细胞明显增殖(0.153±0.01lvs0.115±0.012，p<0.01)，而Jak／STAT3通路阻断剂AG490干预后心肌成纤维细胞增殖明显减弱(0.153±0.01lvs0.135±0.015，p<0.05)，CT-1反义寡核苷酸干预后细胞增殖亦明显减弱(0.132±0.13vsO.153±0.11，p<0.05)。 (2)与对照组相比，压力刺激组CT-1蛋白明显增加(1-56±0.24 VS0.95±0.19，p<0.05)，STAT3mRNA和BadmRNA表达上调(0.539±0.013 VS0.398±0.011vs；0.513±0.025 VS 0.325±0.023，P均<0.05)，但分化抑制基因Id3mRNA表达无明显变化(0.592±0.019 VS 0.567±0.026，P>0.05)。 (3)CT-l反义寡核苷酸干预后，明显抑制CT-1蛋白的表达(1.56±0.24 VS1.03±0.21，P<0.01)；下调STAT3mRNA和BadmRNA表达(0.518±0.012vs0.353±0.014vs，0.502±0.022 VS 0.313±0.019，P均<0.05)，Id3mRNA(0.592±0.019 VS 0.306±0.021，P<0.01)表达明显减少。而CT-1正义寡核苷酸对结论： (1)高静水压能刺激心肌成纤维细胞增殖，CT-1蛋白表达明显增加，而CT-1反义寡核苷酸明显抑制高静水压的促增殖作用，表明CT-1在高静水压促心肌成纤维细胞增殖中起重要作用。 (2)压力刺激心肌成纤维细胞明显增殖，CT-1和STAT3mRNA的表达显著增加，而加入CT-1反义寡核苷酸后，CT-1和STAT3mRNA的表达均明显减少，心肌成纤维细胞增殖减弱；Jak／STAT3通路阻断剂AG490干预后，心肌成纤维细胞增殖亦明显减弱；表明Jak／STAT3信号通路是CT-1促心肌成纤维细胞增殖的细胞内信号转导路径之一。 (3)CT-1可通过影响促凋亡基因Bad和与增殖相关的分化抑制基因Id3的表达，从而对心肌成纤维细胞增殖产生影响。
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