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BRMS1基因影响胃癌细胞在裸鼠体内肿瘤生长及转移的实验研究

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论文说明;英文缩略词表

声明

第1章 引言

第2章 材料和方法

2.1 实验材料

2.1.1细胞株

2.1.2主要试剂和产地

2.1.3主要仪器设备和产地

2.2实验方法

2.2.1 胃癌SGC-7901细胞的培养(空白对照组)

2.2.2 G418克隆筛选

2.2.3 RT-PCR方法检测三组细胞中BRMS1基因的表达

2.2.4裸小鼠皮下移植瘤的建立和传代

2.2.5人胃癌裸鼠移植瘤模型的建立

2.2.6实验观察项目

2.3统计学处理

第3章 结果

3.1 克隆的筛选及鉴定

3.2 RT-PCR法检测目的基因表达

3.3裸小鼠皮下移植瘤

3.4原位移植瘤的生长及转移情况

第4章 讨论

4.1 空白对照组、阴性对照组和转染细胞BRMS1表达鉴定

4.2 BRMS1基因对裸鼠体内肿瘤生长及转移的影响

第5章 结论

致谢

参考文献

附 图

综述胃癌相关肿瘤转移抑制基因研究进展

攻读学位期间的研究成果

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摘要

目的:研究BRMS1基因转染胃癌细胞后对裸鼠体内肿瘤生长及转移的影响。 方法:培养胃癌SGC-7901细胞(空白对照组):转染pcDNA3,1(-)B/myc-BRMS1的胃癌SGC-7901细胞(转染组);转染pcDNA3.1/myc-his(-)B的胃癌SGC-7901细胞(阴性对照组);在300ug/ml的G418加压筛选下,用有限稀释法挑取稳定表达单克隆细胞;用RT-PCR方法证实三组细胞BRMS1基因的表达水平;将裸小鼠随机分为三组,采用三组细胞株经反复传代成实体瘤的完整组织块,建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,观察荷瘤鼠原位移植瘤的生长情况及肿瘤转移情况; 结果:RT-PCR检测BRMS1基因mRNA表达水平,转染组有BRMS1基因表达,阴性对照组和空白对照组均无BRMS1基因表达:裸鼠原位移植瘤生长大小,转染组为12.02±0.70mm,与空白对照组12.89±0.71mm和阴性对照组12.71±0.63mm比较,差异均无统计学意义(P>0.05);裸鼠体内转移灶,转染组为4.38±0.60个,与空白对照组7.63±0.65个和阴性对照组7.75±0.59个比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论:BRMS1基因不影响裸鼠体内胃肿瘤生长,但可抑制胃癌细胞在裸鼠体内的转移。

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