心脉隆对窒息新生鼠心肌HSP70和NF-κB的影响

摘要

目的:
　　 1.采用新生鼠窒息模型,观察窒息新生鼠心肌缺氧缺血损伤及心肌HSP70和NF-κB表达的变化。
　　 2.应用心脉隆干预后,观察窒息新生鼠心肌缺氧缺血损伤及心肌HSP70和NF-κB表达的改变,探讨其抗未成熟心肌缺氧缺血损伤的作用及其机制。
　　 3.比较不同时机心脉隆干预的疗效,探讨临床给药时间。
　　 方法:
　　 1.实验分组:将128只新生7d龄SD大鼠(体重10～15g)按完全随机分为4组:正常组(n=32)、窒息组(n=32)、心脉隆预处理组(n=32)、心脉隆后处理组(n=32),每组再分3h、6h、12h、24h四个时间点,每个时间点各8只。
　　 2.制作新生鼠常压窒息模型:将动物分别置于容积为55ml的磨口瓶中(内装5g钠石灰),待动物安静后,①窒息组:塞紧瓶塞密闭30min,立即复氧120min后,放回母鼠身边继续喂养；②正常组:仅进行模拟常压窒息过程,不塞瓶塞、复氧；③心脉隆预处理组:窒息前5min给予心脉隆5mg/kg腹腔注射；④心脉隆后处理组:窒息后立即给予心脉隆5mg/kg腹腔注射。
　　 3.观察指标:观察心肌组织病理形态学变化；测定新生鼠血清心肌酶(CK—MB)水平；应用免疫组织化学法检测心肌HSP70和NF—κB的表达情况。
　　 4.数据分析:实验数据均以均数±标准差(*x(±s)表示,采用单因素方差分析。P<0.05表示有统计学意义,P<0.01认为有显著性差异。
　　 结果:
　　 1.新生鼠心肌组织病理变化:与正常组相比,窒息组6h见心肌细胞水肿明显,炎症细胞浸润,且随时间延长,上述病变越明显；同时间点比较,心脉隆预处理组和心脉隆后处理组心肌细胞水肿及炎性细胞浸润均比窒息组减轻,且心脉隆后处理组病变最轻。
　　 2.新生鼠血清心肌酶CK—MB值:与正常组比较,窒息组、心脉隆预处理组和后处理组各时间点CK—MB值均显著升高(P<0.01),3h开始升高,6h、12h和24h逐渐增加；与窒息组比较,心脉隆预处理组和后处理组各时间点CK—MB值均显著下降(P<0.01),且心脉隆后处理组各时间点CK—MB值均显著低于心脉隆预处理组(P<0.01)。
　　 3.新生鼠心肌HSP70免疫组织光密度值:与正常组比较,窒息组、心脉隆预处理组和后处理组各时间点HSP70光密度值均显著升高(P<0.01),3h开始升高,6h、12h和24h逐渐增加；与窒息组比较,心脉隆预处理组和后处理组各时间点HSP70光密度值均显著升高(P<0.01),但心脉隆后处理组各时间点HSP70光密度值均显著高于心脉隆预处理组(P<0.01)。
　　 4.新生鼠心肌NF—κB免疫组织光密度值:与正常组比较,窒息组、心脉隆预处理组和后处理组各时间点NF—κB光密度值均显著升高(P<0.01),3h开始升高,6h达到高峰；与窒息组比较,心脉隆预处理组和后处理组NF—κB各时间点光密度值均显著下降(P<0.01),但心脉隆后处理组NF—κB各时间点光密度值均显著低于心脉隆预处理组。(P<0.01)。
　　 结论:
　　 1.新生鼠窒息后心肌细胞水肿,炎性细胞浸润,心肌HSP70与NF—κB表达增高,提示HSP70和NF—κB参与了心肌缺氧缺血性损伤的病理生理过程。
　　 2.心脉隆可以降低心肌酶,减轻心肌损伤病理改变,其心肌保护作用的发挥可能是通过上调心肌HSP70表达和抑制NF—κB表达实现。
　　 3.心脉隆预处理组与后处理组实验结果比较,后者心肌缺氧缺血性损伤更轻,提示心脉隆窒息后处理对缺氧缺血心肌损伤的保护作用更好。