杜仲叶通过激活ERK及AKT磷酸化促进大鼠成骨细胞增殖的研究

摘要

目的
　　研究杜仲叶提取物对大鼠成骨细胞的增殖作用及其分子作用机制。
　　方法
　　选取新生SD大鼠的乳鼠颅盖骨通过消化法分离出乳鼠成骨细胞，并用碱性磷酸酶染色进行细胞鉴定;用杜仲叶提取物分别以0 mg/ml，5mg/ml，20mg/ml，40mg/ml，60mg/ml五种不同浓度梯度对大鼠成骨细胞干预，2d后用MTT方法检测细胞增殖情况;用无血清无酚红的培养基饥饿大鼠成骨细胞2h后，分别以0 mg/ml，5mg/ml，20mg/ml，40mg/ml，60mg/ml五种不同浓度杜仲叶提取物干预大鼠成骨细胞，2h后Western blot检测ERK和AKT的活化情况。
　　结果
　　细胞形态学观察符合大鼠成骨细胞的生长特征;碱性磷酸酶染色后的成骨细胞呈蓝紫色（特异性染色）;MTT法结果显示杜仲叶提取物促进大鼠成骨细胞的增殖，并具有浓度依赖性;Western blot结果显示杜仲叶提取物可使ERK及AKT磷酸化水平提高，并具有浓度依赖性。
　　结论
　　杜仲叶提取物通过激活ERK及AKT磷酸化促进大鼠成骨细胞的增殖。

目录

声明

摘要

中英文缩写词表

第1章 引言

第2章 材料与方法

2．1 实验材料

2．1．1 实验动物

2．1．2 实验试剂

2．1．3 实验药物

2．1．4 实验仪器

2．2 实验方法

2．2．1 实验器材准备

2．2．2 大鼠成骨细胞的分离、培养

2．2．3 大鼠成骨细胞的形态学观察

2．2．4 碱性磷酸酶染色对大鼠成骨细胞进行细胞鉴定

2．2．5 实验分组

2．2．6 MTT法检测细胞增殖

2．2．7 Western blot法检测大鼠成骨细胞中Erk、p-Erk、Akt、p-Akt的蛋白表达水平

2．3 统计学处理

第3章 结果

3．1 细胞的形态学观察

3．2 碱性磷酸酶染色

3．3 MTT检测

3．4 Western blot检测

第4章 讨论

4．1 成骨细胞的实验研究概述

4．1．1 成骨细胞的分离、培养

4．1．2 成骨细胞的鉴定

4．2 相关细胞和细胞因子在骨质疏松中的研究

4．3 相关信号通路在骨质疏松中的研究

4．4 杜仲在骨质疏松中的研究

4．5．展望

第5章 结论

致谢

参考文献

附图

攻读硕士期间研究成果

综述 骨质疏松相关信号通路的研究进展