β-catenin、APC和CD44、CD133在肺癌组织中的表达研究

摘要

目的:
　　探讨β-catenin、APC和CD44、CD133在肺癌组织中的表达及与肿瘤分化、浸润和转移的关系。
　　方法:
　　选取南昌大学第二附属医院胸外科2012年6月-2012年12月未接受过放疗、化疗且行肺癌根治术患者的新鲜肺癌组织标本40例，同时收集相应癌旁组织（距癌组织2cm-5cm的非癌组织），所有组织标本均术中冰冻确诊为恶性，30分钟内立即取材置于-80℃低温冰箱保存备用;术后石蜡切片证实为肺癌，癌旁组织均证实为不含癌的肺组织。采用RT-PCR法检测40例肺癌组织及其癌旁组织中β-catenin、APC和CD44、CD133的mRNA表达情况。应用spss17统计学软件进行数据分析，计数资料两样本率的比较采用卡方检验或Fisher精确检验方法，等级资料的两两比较用spearman相关分析，双侧检验P＜0.05认为有统计学意义。
　　结果:
　　1、肺癌及癌旁肺组织中β-catenin基因阳性表达率分别为80％(32/40)、10％(4/40)，APC基因阳性表达率分别为30％(12/40)，82.5％(33/40); CD44基因阳性表达率分别为85％(34/40)，60％(24/40); CD133基因阳性表达率分别为72.5％(29/40)，30％(12/40)。β-catenin、CD44、CD133基因在肺癌组织中表达水平高于癌旁组织(x2=39.596，P=0.000; x2=6.270，P=0.012;x2=14.459，P=0.000);APC基因则在肺癌组织中表达水平低于癌旁组织(x2=22.400，P=0.000);差异有统计学意义。
　　2、β-catenin mRNA在肺癌中的表达水平与患者性别、年龄、吸烟状况及肺癌的分化程度、浸润程度、及病理类型相关性无统计学意义(P＞0.05)，与淋巴结转移相关性有统计学意义(P＜0.05); APC mRNA在肺癌中的表达水平与患者性别、年龄、吸烟状况及肺癌的浸润程度、有无淋巴结转移相关性无统计学意义(P＞0.05)，腺癌中表达高于鳞癌，分化程度越高，APC mRNA表达水平越低，差异有统计学意义(P＜0.05); CD44、CD133 mRNA在肺癌中的表达水平与患者性别、年龄、吸烟状况及肺癌的分化程度、浸润程度及有无淋巴结转移相关性无统计学意义(P＞0.05)，CD44mRNA、CD133mRNA在鳞癌中的表达水平高于腺癌(P＜0.05)。
　　3、在肺癌组织中，β-catenin和APC，β-catenin和CD133，CD44和CD133两两比较差异有统计学意义(P＜0.05);β-catenin和CD44，APC和CD44，APC和CD133两两比较差异无计学意义(P＞0.05)。肺癌组织中β-catenin、APC、CD44、CD133 mRNA表达的两两比较，β-catenin和CD44，APC和CD44，APC和CD133两两之间相关性不密切(P＞0.05);β-catenin和APC呈负相关(P＜0.05);β-catenin和CD133，CD44和CD133两两呈正相关(P＜0.05)。
　　结论:
　　1、β-catenin、CD44、CD133基因高表达可能促进肺癌发生发展，而APC基因高表达可能抑制肺癌发生发展。
　　2、肺癌中β-catenin基因表达水平与肺癌淋巴结转移有关，可能为预测淋巴结转移的指标之一，APC基因的表达水平与肺癌恶性程度相关。
　　3、肺癌组织中β-catenin和APC的表达呈负相关，提示APC对β-catenin有抑制作用，CD133和β-catenin、CD44正相关，提示在肺癌形成中CD133与β-catenin、CD44有正向协同作用。

目录

声明

摘要

中英文缩写注释表

第1章 前言

第2章 材料与方法

2．1 实验材料

2．1．1 研究对象

2．1．2 实验仪器

2．1．3 实验试剂

2．1．4 引物设计与合成

2．2 实验方法

2．2．1 RNA的提取

2．2．2 逆转录合成cDNA

2．2．3 PCR扩增目的基因

2．2．4 PCR反应

2．3 统计学分析

第3章 结果

3．1 RT-PCR结果

3．1．1 肺癌及癌旁组织中β-catenin基因表达

3．1．2 肺癌及癌旁组织中APC基因表达

3．1．3 肺癌及癌旁组织中CD44基因表达

3．1．4 肺癌及癌旁组织中CD133基因表达

3．2 β-catenin、APC、CD44、CD133基因在肺癌组织和癌旁组织中的表达情况

3．2．1 β-catenin、APC、CD44、CD133 mRNA在肺癌组织中表达的阳性率

3．2．2 β-catenin mRNA在肺癌及癌旁组织中的表达情况

3．2．3 APC mRNA在肺癌及癌旁组织中的表达情况

3．2．4 CD44 mRNA在肺癌及癌旁组织中的表达情况

3．2．5 CD133 mRNA在肺癌及癌旁组织中的表达情况

3．3 β-catenin、APC、CD44、CD133基因在肺癌组织中的表达与临床病理特征之间的关系

3．3．1 β-catenin mRNA在肺癌组织中的表达与临床病理学指标的关系

3．3．2 APC mRNA在肺癌组织中的表达与临床病理学指标的关系

3．3．3 CD44 mRNA在肺癌组织中的表达与临床病理学指标的关系

3．3．4 CD133 mRNA在肺癌组织中的表达与临床病理学指标的关系

3．4 β-catenin、APC、CD44、CD133 mRNA在肺癌组织中的表达两两比较

3．4．1 β-catenin、APC、CD44、CD133在肺癌组织中的表达两两比较

3．4．2 β-catenin、APC、CD44、CD133 mRNA在肺癌组织中表达的两两相关性分析

第4章讨论

4．1 Wnt信号通路基因β-catenin、APC表达及意义

4．2 肿瘤干细胞标志物CD133、CD44表达及意义

4．3 β-eatenin、APC、CD44和CD133表达差异及相关性分析

4．4 总结及展望

第5章 结论

致谢

参考文献

攻读学位期间研究成果

综述 CD133在肺肿瘤干细胞中的研究进展