急性心肌梗死合并室颤与MMP-9、TIMP-1表达水平的相关性研究

摘要

目的:
　　本研究对急性心肌梗死合并室颤患者急性期MMP-9及TIMP-1表达水平与急性心肌梗死未合并室颤患者进行对比,探讨急性心肌梗死后合并室颤的可能相关机制。
　　方法:
　　实验分组
　　心肌梗死合并室颤组(实验组):2012年6月至2013年6月期间,我院心内科、急诊科患者中10例患者纳入研究,诊断标准符合急性心肌梗死及室颤诊断标准。入选患者平均年龄为(56.62±9.76)岁,其中男6例,女4例。
　　急性心肌梗死未合并室颤组(对照组):2012年6月至2013年6月期间,我院心内科、急诊科患者中10例患者纳入研究,诊断标准符合急性心肌梗死诊断标准。入选患者平均年龄为(60.73±10.24)岁,其中男5例,女5例。
　　实验方法:
　　实验组及对照组于发病后第1、3、5天各抽取外周静脉血5mL,-20℃冰箱保存。以β-actin作为内参,采用Real-time PCR扩增测定MMP-9基因表达情况。采用ELISA法测定血清MMP-9与TIMP-1水平。同时收集患者临床资料,进行统计学分析。
　　结果:
　　1.实验提取的总 RNA经过紫外分光光度仪进行检测,结果显示纯度A260/A280nm在1.8-2.0之间,RNA浓度高,提示提取的RNA可用于DNA合成及Real-time PCR扩增。
　　2.实验组第1d、3d、5d MMP-9基因表达ΔCT随着观察时间延长呈下降趋势。实验组第1d MMP-9基因表达比对照组第1d高1.73倍(1.03-2.96)。实验组第3d MMP-9基因表达比对照组第3d高1.54倍(1.09-2.92);实验组第5d MMP-9基因表达比对照组第5d高1.61倍(1.07-3.09)。
　　3.实验组和对照组血清MMP-9水平都随着观察时间的延长呈上升趋势,第1d至第3d升高最为显著,第3d后MMP-9水平相对稳定,至观察期结束,MMP-9水平未显著下降。实验组第1d MMP-9水平(12.21±2.96μg/L)显著高于对照组第1d MMP-9水平(9.77±1.32μg/L)(P<0.05)。实验组第3d MMP-9水平(19.65±4.94μg/L)显著高于对照组第3d MMP-9水平(13.97±5.76μg/L)(P<0.05)。实验组第5d MMP-9水平(20.76±6.45μg/L)显著高于对照组第5d MMP-9水平(15.78±6.02μg/L)(P<0.05)。
　　对照组第3d、5d血清 MMP-9水平显著高于对照组第1d血清MMP-9水平(P均<0.05)。实验组第1d、3d和5d血清 MMP-9水平差异具有统计学意义(P<0.05),实验组第3d、5d血清 MMP-9水平显著高于实验组第1d血清MMP-9水平(P均<0.05)。
　　4.实验组和对照组血清TIMP-1水平均随着观察时间的延长而升高,第1d至第3d升高最为显著,第3d后TIMP-1水平相对稳定,至观察期结束,TIMP-1水平未显著下降,两组上升趋势基本相同。实验组TIMP-1水平显著高于同时相对照组TIMP-1水平(P均<0.05);对照组第3d、5d TIMP-1水平显著高于对照组第1d TIMP-1水平(P均<0.05);实验组第3d、5d的TIMP-水平显著高于实验组第1d TIMP-1水平(P均<0.05)。
　　5.实验组第1d血清MMP-9与TIMP-1水平直线回归系数为r=0.736,直线回归方程为Y=24.497+2.819X,实验组第1d血清 MMP-9与TIMP-1呈明显正相关(P<0.05)。实验组第3d MMP-9与TIMP-1水平直线回归系数为r=0.782,直线回归方程为Y=9.592+0.174X,实验组3d血清MMP-9与TIMP-1水平呈明显正相关(P<0.05)。实验组第5d血清 MMP-9与TIMP-1水平直线回归系数为r=0.634,直线回归方程为Y=23.407+2.039X,实验组第5d血清MMP-9与TIMP-1水平呈明显正相关(P<0.05)。
　　6.实验组与对照组在年龄、性别、吸烟史一般资料差异不具有统计学意义(P均>0.05)。实验组收缩压、空腹血糖及 hs-CRP水平显著高于对照组(P均<0.05)。急性心肌梗死合并室颤与 hs-CRP(OR:1.742,95％CI:1.896-3.467)、收缩压(OR:2.835,95%CI:1.896-3.467)、空腹血糖(OR:1.801,95%CI:1.436-2.347)均呈明显正相关(P均<0.05)。
　　结论:
　　1.实验组同时间点MMP-9基因表达及血清MMP-9水平显著高于对照组各时间点。提示MMP-9基因高水平表达在急性心肌梗死合并室颤发生时其水平升高可能是机体炎症细胞(巨噬细胞、肥大细胞等)细胞合成分泌增加所致。
　　2.实验组各时间点血清MMP-9、TIMP-1水平显著高于同一时间点对照组MMP-9、TIPM-1水平。提示急性心肌梗死合并室颤发生与血清MMP-9、TIMP-1水平升高之间存在某种关联性,即高水平MMP-9、TIMP-1预示急性心肌梗死患者发生室颤的可能性更高。

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中英缩略词表

第1章 前言

1.1 心肌梗死

1.2基质金属蛋白酶（MMPs)

1.3基质金属蛋白酶组织抑制剂

第2章 材料与方法

2.1材料与设备

2.2 方法

2.3 统计学处理

第3章 结果

3.1 总RNA提取结果

3.2 Real-time PCR检测结果

3.2.2Real-time PCR检测 MMP-9基因表达分析

3.3 ELISA法检测血清MMP-9及TIMP-1水平

3.4 实验组MMP-9与TIMP-1相关性

3.5实验组与对照组一般资料比较

3.6 实验组与对照组危险因素比较

3.7 实验组多因素分析

第4章 讨论

4.1 急性心肌梗死

4.2 MicroRNA

4.3 实时荧光定量PCR技术

4.4基质金属蛋白酶（MMPs）

4.5 基质金属蛋白酶组织抑制剂（TIMPs）

4.6 MMPs/TIMPs

4.7 AMI合并室颤患者的临床危险因素

第5章 结论

第6章 展望

致谢

参考文献

综述

参考文献