mTORC1信号通路在小鼠化疗胃黏膜损伤中的作用

摘要

目的：
　　探讨mTORC1信号通路在使用化疗药物BU+CY后小鼠胃黏膜损伤过程中的作用。
　　方法：
　　将8周SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为4组，即正常对照组，BU+CY组，Rapamycin组和BU+CY+Rapamycin组，每组15只。各组分别于造模后2D、6D和14D处死，在各观察时间点处死小鼠前2小时，对实验小鼠腹腔注射BrdU(120mg/kg体重)，处死小鼠后取胃体组织，放入4℃4％多聚甲醛液中固定15h，石蜡包埋，作5μm连续切片，取相邻切片分别进行常规HE染色、TUNEL方法检测和免疫组织化学方法检测。以HE染色观察胃组织病理变化，采用免疫组织化学二步法显示小鼠胃黏膜的BrdU阳性细胞和PS6阳性蛋白表达，用TUNEL方法显示凋亡细胞，采用图像分析仪进行体视学测量和图像分析。
　　结果：
　　1.HE染色可见BU+CY组小鼠胃黏膜损伤明显，黏膜表面上皮细胞脱落，胃底腺排列不规则，有炎症细胞浸润；与BU+CY组相比，BU+CY+Rapamycin组小鼠胃黏膜损伤明显减轻；
　　2.与正常对照组相比，BU+CY组胃黏膜BrdU阳性细胞数密度显著降低（P＜0.01），BU+CY+Rapamycin组则基本恢复至正常值；
　　3.与正常对照组相比，BU+CY组胃黏膜凋亡细胞显著增加（P＜0.01），BU+CY+Rapamycin组则明显恢复，与正常组无统计学差异；
　　4.与正常对照组相比，BU+CY组PS6免疫阳性蛋白积分光密度明显增高（P＜0.01），提示mTORC1通路强烈激活，而BU+CY+Rapamycin组的积分光密度则显著降低，表示mTORC1通路受到抑制；
　　5.Rapamycin组可出现BrdU阳性细胞数密度降低、凋亡细胞增加。
　　结论：
　　化疗药物BU+CY可激活mTORC1信号通路、抑制胃黏膜上皮细胞增殖和促进胃黏膜上皮细胞凋亡引起胃黏膜损伤，且这种损伤可被Rapamycin逆转。

目录

声明

中英文缩略词表

第1章 引言

第2章 材料与方法

2.1 材料

2.2实验方法

第3章 结 果

3.1 胃黏膜组织病理学观察

3.2 胃黏膜BrdU免疫反应阳性细胞的检测

3.3 胃黏膜凋亡细胞的检测

3.4胃底腺PS6的检测

第4章 讨 论

4.1 化疗药物对胃黏膜上皮组织的影响

4.2. mTORC1信号通路在化疗胃黏膜损伤过程中的作用

第5章 结论与展望

5.1 结论

5.2 展望

致谢

参考文献

攻读学位期间的研究成果

综述:mTOR信号通路及其抑制剂的研究进展