不同浓度前列腺素E2对生长发育后期SD大鼠下颌前伸后髁突生长影响的研究

摘要

目的：
　　采用不同浓度前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）对生长发育后期下颌前伸大鼠的颞下颌关节局部注射，探讨 PGE2对其髁突生长改建的影响及最佳有效浓度；同时利用组织学和免疫组织化学技术，从细胞水平和分子水平分析髁突软骨内成骨过程的生物学机制，为将 PGE2临床应用于生长发育后期下颌后缩患者的治疗提供一定的参考。
　　方法：
　　将7周龄健康雄性SD大鼠56只，随机分成空白对照组8只、前伸对照组8只和实验组40只。空白对照组大鼠保持自然生长，前伸对照组和实验组大鼠每天24小时佩戴咬合前导装置。实验组大鼠再随机分成C1~C55个亚组，每组8只，在前导下颌的同时分别采用0.25mg/ml、0.5mg/ml、1mg/ml、2mg/ml和4mg/ml PGE2进行双侧颞下颌关节腔的局部注射。PGE2每3天注射1次，共注射7次。在实验开始当天和实验结束前1天对所有大鼠肌肉注射盐酸四环素（30mg/kg）进行荧光标记。所有大鼠于最后一次注射 PGE2后2天处死，取双侧完整髁突于4％多聚甲醛溶液中固定。左侧髁突制作脱钙骨组织切片，经HE染色后观察髁突软骨及软骨下骨的组织学形态，同时经免疫组织化学染色后检测分析髁突软骨内VEGF、Sox9和II型胶原的分布、表达情况；右侧髁突制作不脱钙骨组织切片，用以荧光显微镜下四环素荧光标记带的观察及髁突软骨厚度和荧光条带之间距离的测量分析。
　　结果：
　　1. HE染色结果
　　空白对照组、前伸对照组和C1~C4实验组中髁突软骨纤维层、增殖层、成熟层、肥大层和钙化软骨层细胞结构清晰，相互移行。而 C5组中多数样本可见髁突软骨层结构紊乱、细胞排列散乱、软骨部分剥脱及骨小梁间隙内大量的红细胞和炎症细胞浸润等病理改变。
　　2.免疫组织化学染色结果
　　前伸对照组中 VEGF的表达水平高于空白对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；C1、C2、C3和前伸对照组间 VEGF的表达水平无统计性差异（P＞0.05）；C4和C5组中VEGF的表达水平高于前伸对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；C5组中VEGF的表达水平较C4组明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。
　　前伸对照组中 Sox9的表达水平高于空白对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；C1、C5和前伸对照组间Sox9的表达水平无统计差异（P＞0.05）；C2、C3和 C4组中 Sox9的表达水平高于前伸对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；C2、C3和C4组间Sox9的表达水平无统计学差异（P＞0.05）。
　　前伸对照组中 II型胶原的表达水平高于空白对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；C1、C2和前伸对照组间II型胶原的表达水平无统计学差异（P＞0.05）；C3和 C4组中 II型胶原的表达水平高于前伸对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；C3和C4组间II型胶原的表达水平无统计学差异（P＞0.05）；C5组中II型胶原的表达水平低于前伸对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。
　　3.髁突软骨厚度的测量结果
　　前伸对照组中髁突软骨的厚度高于空白对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；C1、C2和前伸对照组间髁突软骨的厚度无统计学差异（P＞0.05）；C3和C4组中髁突软骨的厚度高于前伸对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；C3和C4组间髁突软骨的厚度无统计学差异（P＞0.05）；C5组中髁突软骨的厚度低于前伸对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。
　　4.荧光条带之间距离的测量结果
　　前伸对照组中荧光条带之间的距离大于空白对照组，差异有统计学意义（ P＜0.05）；C1、C2和前伸对照组间荧光条带之间的距离无统计学差异（P＞0.05）；C3和C4组中荧光条带之间的距离大于前伸对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；C3和C4组间荧光条带之间的距离无统计学差异（P＞0.05）；C5组中荧光条带之间的距离小于前伸对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:
　　1.下颌前伸对生长发育后期大鼠髁突的适应性改建有一定的促进作用。
　　2.下颌前伸结合颞下颌关节腔注射PGE2时，0.25mg/ml和0.5mg/ml较低浓度的 PGE2对髁突的软骨内成骨不会产生进一步的影响；1mg/ml和2mg/ml浓度的PGE2能促进软骨下新骨的进一步形成；而4mg/ml较高浓度的PGE2则会减少软骨下新骨的形成。

目录

中英文缩略词表

第1章 引言

第2章 材料与方法

2.1 实验材料

2.2 实验方法

2.3 组织标本的制备与观察

2.4 统计分析

第3章 结 果

3.1动物的一般情况

3.2 HE染色结果

3.3 免疫组化染色结果

3.4 四环素荧光标记结果

第4章 讨论

4.1 实验模型的建立

4.2 免疫组化染色结果分析

4.3 髁突软骨厚度及软骨下骨的变化

第5章 结论

致谢

参考文献

攻读学位期间的研究成果

综述:外源性因素影响髁突生长改建的研究进展

病例报告1

病例报告2

病例报告3

病例报告4

病例报告5