腹水中肝素结合蛋白在自发性细菌性腹膜炎早期诊断中的应用

摘要

目的： 自发性细菌性腹膜炎（SBP）指没有明确空腔脏器破损、局部炎症等需要外科手术治疗的确切感染性病灶而出现的腹膜的细菌性炎症。SBP发病大都隐匿，不利于早期诊断，肝素结合蛋白（HBP）具有趋化特性、调节炎症反应、抗菌活性的作用，SBP也是一种炎性病变，本项研究旨在探讨腹水中的HBP对SBP的早期诊断价值，指导临床早期预治疗。血清降钙素原（PCT）在机体受到细菌感染后水平明显上升，且PCT的稳定性较高，在血液中的浓度很少受到其他非感染性因素的影响，不仅可反映全身性感染还可用于局部感染。本项研究旨同时探讨血清PCT对SBP的早期诊断价值。 方法： 收集我院2016年1月-2017年6月收治住院的肝硬化腹水且发生SBP的患者40例作为研究组，并且选择同一时期住院的肝硬化漏出性腹水非SBP患者40例为对照组，另外还包括癌性腹水和结核性腹水患者各20例予以对照，纳入患者全部进行腹腔积液细菌学培养与腹水PMN计数，已验证病例分组的准确性，同时检测腹水HBP和血清PCT。HBP采用肝素结合蛋白试剂盒，给予双抗体夹心法进行检测；PCT采用乳胶增强免疫比浊法检测；腹腔积液的细菌培养在患者病床旁边进行，操作过程要求完全无菌，抽取腹腔积液10 ml，即刻打入血培养瓶中，采用全自动微生物分析仪行药敏试验和细菌判定，对于产超广谱β-内酰胺酶菌株表型初筛，确认试验使用K-B纸片法，参照美国临床和实验室标准协会推荐的抗菌药物敏感性试验标准进行判断，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌通过头孢西丁纸片法进行判别；腹水常规检测，先用吸管汲取0.35 mol/L冰醋酸后全部吹出，使吸管的管壁粘附着少量冰醋酸，随后使用同一个吸管汲取少许混合均匀的腹水破坏红细胞以后充池，放置大约2-3分钟后，采用中间及4个角作为计算的框架，计数总共5个大方块内的有核细胞的数量×2×106/L，倘若白细胞计数仍然较多，则采用白细胞稀释液进行倍比稀释，最终乘以稀释的倍数进行相关统计学分析。 结果： 肝硬化腹水发生SBP组男23例，女17例，平均年龄（62.3±9.7），肝硬化腹水非SBP组男21例，女19例，平均年龄（65.2±7.4）；结核性腹水组男12例，女8例，平均年龄（59.7±7.2），癌性腹水组男13例，女7例，平均年龄（60.4±8.1），四组患者性别，年龄无统计学差异（P＞0.05），肝硬化SBP组腹水HBP值为（60.85±14.66）ng/mL，肝硬化腹水非SBP组腹水HBP值为（9.42±1.75）ng/mL，癌性腹水组腹水HBP值为（13.74±3.07）ng/mL，结核性腹水组腹水HBP值为（9.23±1.49）ng/mL，肝硬化SBP组腹水HBP浓度与其余三组对照均显著升高（t=3.509,P=0.001；t=2.047，P=0.036；t=2.462，P=0.022），差异具有统计学意义；肝硬化SBP组血清PCT值为（4.97±2.18）ng/mL，肝硬化腹水非SBP组血清PCT值为（0.28±0.19）ng/mL，癌性腹水组血清PCT值为（0.37±0.08）ng/mL，结核性腹水组血清PCT值为（0.43±0.21）ng/mL，肝硬化SBP组血清PCT浓度与其余三组对照均显著升高（t=4.081,P=0.001；t=3.352，P=0.013；t=2.973，P=0.025），差异具有统计学意义。PCT的ROC曲线下面积为0.831，当取血清PCT诊断SBP的最佳临界值（cutoff值）为0.62 ng/ml时，敏感性为86.3%，特异性为52.8%。腹水HBP的ROC曲线下面积为0.962，当取诊断SBP最佳值为23.54 ng/mL时，敏感性为92.3%，特异性为65.4%，充分证实了HBP应用于肝硬化腹水SBP的诊断价值，腹水HBP与血清PCT两者的相关性发现，两者具有高度相关性（r=0.776，P=0.000）。 结论： 1）肝硬化腹水SBP患者HBP水平显著高于肝硬化腹水非SBP组、癌性腹水组、结核性腹水组，可作为SBP的早期诊断指标应用于临床； 2）肝硬化腹水SBP患者PCT水平显著高于肝硬化腹水非SBP组、癌性腹水组、结核性腹水组，可作为SBP的早期诊断指标应用于临床； 3）肝硬化腹水 SBP组患者的腹腔积液HBP与血清PCT具有显著相关性，两者联合检测可提高SBP的诊断效能。

目录

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中英文缩略词表

第1章 引言

第2章 资料与方法

2.1 研究对象

2.2 诊断标准

2.2.1诊断自发性细菌性腹膜炎的标准

2.2.2 肝硬化诊断标准

2.2.3结核性腹水的诊断标准

2.2.4 癌性腹水的诊断标准

2.3 检查方法

2.3.1 HBP的检测方法

2.3.2 PCT检测方法

2.3.3腹水常规检查

2.3.4腹水培养

2.4 实验步骤及仪器设备

2.4.1 HBP的检测

2.4.2降钙素原的检测

2.5 统计学分析

第3章 结果

3.1 一般资料的比较

3.3肝硬化SBP组、肝硬化腹水非SBP组、癌性腹水组、结核性腹水组血清PCT的比较

3.4 肝硬化SBP组、肝硬化腹水非SBP组、癌性腹水组、结核性腹水组腹水PMN的比较

3.5 腹水HBP对SBP患者腹水培养细菌学阳性的鉴别意义

3.6 腹水HBP、血清PCT的ROC曲线结果

3.7腹水HBP、血清PCT的Spearman相关性分析

第4章 讨 论

第5章 结论

致谢

参考文献

攻读学位期间的研究成果

综述:肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎早期诊断的研究进展