不同浓度雌激素对大鼠髁突组织学形态影响的实验研究

摘要

目的： 本实验选用环磷酰胺诱导大鼠卵巢早衰，造成体内血清雌激素水平下降，而后通过灌胃给药给予不同浓度雌激素，分时间梯度观察每个阶段髁突软骨及软骨下骨的组织形态学变化。初步探寻ICR的发病机制及为雌激素补充治疗能否适用于ICR提供实验依据，并寻求雌激素治疗的最适浓度。 方法： 选用动情周期正常的6周龄雌性SD大鼠75只随机平分为5组。 A组实验组（环磷酰胺+戊酸雌二醇0.0525mg/kg组)：根据大鼠体重算出环磷酰胺的剂量,将环磷酰胺稀释于1ml的生理盐水中，给予大鼠腹腔注射环磷酰胺首剂量50mg/kg，以8mg/(kg.d)的维持剂量连续注射14天。实验第4周，根据大鼠体重算出戊酸雌二醇的剂量（0.0525mg/kg），将戊酸雌二醇稀释于1ml的生理盐水中，每日经胃肠道给药，持续至第12周结束。 B组实验组（环磷酰胺+戊酸雌二醇0.105mg/kg组)：根据大鼠体重算出环磷酰胺的剂量,将环磷酰胺稀释于1ml的生理盐水中，给予大鼠腹腔注射环磷酰胺首剂量50mg/kg，以8mg/(kg.d)的维持剂量连续注射14天。实验第4周，根据大鼠体重算出戊酸雌二醇的剂量（0.105mg/kg），将戊酸雌二醇稀释1ml的生理盐水中，每日经胃肠道给药，持续至第12周结束。 C组实验组（环磷酰胺+戊酸雌二醇0.21mg/kg组)：根据大鼠体重算出环磷酰胺的剂量,将环磷酰胺稀释于1ml的生理盐水中，给予大鼠腹腔注射环磷酰胺首剂量50mg/kg后，8mg/(kg.d)的维持剂量连续注射14天。实验第4周，根据大鼠体重算出戊酸雌二醇的剂量（0.21mg/kg），将戊酸雌二醇稀释于1ml的生理盐水中，每日经胃肠道给药，持续至第12周结束。 D组对照组（环磷酰胺组)：根据大鼠体重算出环磷酰胺的剂量,将环磷酰胺稀释于1ml的生理盐水中，给予大鼠腹腔注射环磷酰胺首剂量50mg/kg，以8mg/(kg.d)的维持剂量注射14天。 E组空白对照组：自由饲养，不作任何相关处理。 在实验前、实验第4周、实验第8周及实验12周分别取血进行血清雌二醇(E2)浓度测定；实验第4周、第8周，第12周每组分别处死5只SD大鼠，取下颌骨髁突制成组织切片，HE染色后观察髁突的组织学形态及选取100倍高倍视野，用imgpro plus6.0软件检测大鼠髁突软骨下骨的骨参数（骨小梁数目，骨小梁间距，骨小梁厚度）。 结果： ⑴血清雌二醇浓度测量结果显示： Ⅰ：实验第4周，A组、B组、C组、D组血清雌二醇浓度较E组均明显下降，差异具有统计学意义（P＜0.05）。 Ⅱ：实验第8周，第12周，与D组相比，A组、B组、C组血清雌二醇浓度显著上升，差异具有统计学意义（P<0.05）。B组血清雌二醇浓度上升程度高于A组、C组，其差异具有统计学意义（P<0.05）。A组、B组、C组实验第12周雌二醇浓度高于第8周，其差异具有统计学意义（P<0.05）。 ⑵髁突组织学形态变化显示： Ⅰ：实验第4周，与E组相比，A组、B组、C组、D组大鼠髁突软骨层结构发生变化，细胞层厚度均有明显减少，细胞排列较紊乱。骨小梁数目减少，排列疏松，骨髓腔增大。E组细胞各层分层明显、排列致密。骨小梁排列整齐致密。 Ⅱ：实验第8周、第12周，与D组相比，随着时间的推移，A组、B组、C组大鼠髁突软骨层厚度增加，骨髓腔变小，出现修复性改变。B组修复性改变最为显著。 （3）髁突软骨下骨组织形态变化显示： Ⅰ：实验第4周，与E组相比，A组、B组、C组、D组大鼠骨小梁数目和厚度均减少，骨小梁间距增宽。其结果具有统计学差异（P<0.05）。 Ⅱ：实验第8周，第12周，与D组相比，A组、B组、C组大鼠骨小梁数目和厚度均增加，骨小梁间距增宽。B组变化最为显著，其结果具有统计学差异（P<0.05）。A组、B组、C组、D组实验第8周骨小梁数目和厚度、骨小梁间距与第12周无明显差异(p>0.05)。 结论： 1：在本实验条件下，环磷酰胺诱导大鼠血清雌二醇浓度下降，大鼠髁突软骨细胞厚度变薄、细胞结构紊乱，骨小梁数目变少，骨髓腔增大。 2：在本实验条件下，通过胃肠道给予不同浓度戊酸雌二醇（0.0525mg/kg、0.105mg/kg、0.21mg/kg），大鼠血清雌二醇浓度升高，髁突软骨细胞厚度增加，骨髓腔变小，软骨及软骨下骨出现修复性改变。且浓度为0.105mg/kg时，修复性改变最为明显。

目录

声明

英文缩写表

第1章 引言

第2章 材料与方法

2.1 实验材料

2.2 试验方法

2.3 统计学处理

第3章 结果

3.1 大鼠体重变化

3.2 大鼠动情周期测量结果

3.3 大鼠血清E2浓度测量结果

3.4 大鼠髁突组织学形态检测结果

3.5大鼠髁突软骨下骨形态计量学分析

第4章 讨论

4.1 卵巢早衰

4.2 环磷酰胺对卵巢、骨的影响

4.3 雌激素与骨质疏松症

4.4 ICR的发病机制

第5章 结论、实验不足与展望

5.1结论

5.2实验不足与展望

致谢

参考文献

综述:特发性髁突吸收的研究进展

病例报告一

病例报告二

病例报告三

病例报告四

病例报告五