苜蓿多糖和黄芪多糖对肉仔鸡抗氧化性能影响的研究

摘要

植物多糖是天然大分子物质，因其来源广泛、效果确切且纯天然，而受到人们的普遍重视。大量试验证明，植物多糖具有广泛的生物活性，普遍存在免疫调节作用，能够促进淋巴细胞增殖转化。机体免疫与自由基的关系非常密切，可通过提高机体的抗氧化作用消除活性氧自由基，从而增强机体的免疫。苜蓿多糖(water soluble alfalfa polysaccharide，WSAP)和黄芪多糖(astragalus polysaccharide，APS)分别是从紫花苜蓿和黄芪中提取的多糖，目前有关WSAP和APS的报道多集中于免疫方面，抗氧化效果虽然也有所报道，但是因多糖的植物产地、提取方法等因素的影响，其化学组成和结构会不一样，因此相同的多糖抗氧化效果也不同。本研究以Abore Acre商品代肉仔鸡为试验动物，通过测定抗氧化指标来探讨WSAP和APS对肉仔鸡抗氧化性能的影响，从而为WSAP和APS免疫机理的研究及在生产中的应用提供试验依据。
　　 试验一：WSAP和APS多糖含量的测定及体外抗氧化活性的研究。
　　 本试验旨在研究WSAP和APS两种植物多糖的多糖含量及体外抗氧化活性。采用蒽酮-硫酸法、DPPH自由基法、邻二氮菲-Fe2+氧化法、邻苯三酚自氧化法分别测定WSAP和APS的多糖含量以及清除DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基的能力。结果表明：WSAP和APS多糖含量为37.84％，57.89％。两种多糖均具有清除DPPH、羟自由基及超氧阴离子自由基的作用，并且随着多糖浓度的增加，清除DPPH、羟自由基及超氧阴离子自由基的能力也逐渐增强，呈现明显的剂量-效应关系。WSAP和APS对DPPH自由基的清除率达50％时所需多糖浓度(IC50)分别为：0.251mg/mL、0.851mg/mL；对于羟自由基，两种多糖的IC50分别为：0.573mg/mL、0.907mg/mL；对于超氧阴离子自由基，两种多糖的IC50分别为：0.482mg/mL、0.637mg/mL。表明WSAP和APS在体外均具有良好的抗氧化作用，且WSAP清除DPPH、羟自由基和超氧阴离子自由基的能力均强于APS。
　　 试验二：WSAP和APS对肉仔鸡抗氧化活性的影响。
　　 本试验旨在研究WSAP和APS对肉仔鸡生长性能和抗氧化性能的影响。将25、50、100、200、500、1000、2000 mg/Kg添加剂量的WSAP和100、200、400、800、1000、2000 mg/Kg添加剂量的APS加入到肉仔鸡日粮中，用试剂盒测定肉仔鸡血清中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量、抑制羟自由基和超氧阴离子自由基的能力以及丙二醛(MDA)的含量。结果表明：WSAP和APS两种多糖对肉仔鸡的生长性能都有促进作用。WSAP对肉仔鸡的促生长作用主要表现在生长前期，以500 mg/Kg的添加量效果最好；而APS对肉仔鸡的促生长作用主要表现在生长后期，以1000mg/Kg的添加量效果最好。WSAP和APS在一定添加剂量下对肉仔鸡均有不同程度的抗氧化作用，能显著提高其T-AOC，增加其T-SOD、GSH-Px活性，抑制其羟自由基、超氧阴离子自由基的产生，从而减少MDA的生成，且对肉仔鸡的抗氧化作用有一定的剂量-效应关系，WSAP以500 mg/Kg添加剂量的效果最好，APS以1000 mg/Kg添加剂量的效果最好。表明WSAP和APS能显著提高肉仔鸡的生长性能和抗氧化性能，抗氧化性能可能是两种多糖发挥免疫作用的机制之一。
　　 试验三：WSAP和APS对肉仔鸡淋巴细胞抗氧化活性的影响。
　　 本试验旨在研究苜蓿多糖(WSAP)和APS对肉仔鸡外周血和脾脏中淋巴细胞抗氧化性能的影响。将2、4、8、15、25、50、100μg/mL浓度的WSAP和12.5、25、50、100、200、400、800、1000、2000μg/mL浓度的APS加入到体外培养的鸡血液淋巴细胞和脾脏淋巴细胞中，培养24 h后用试剂盒测定培养的细胞上清液中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量、抑制羟自由基和超氧阴离子自由基的能力以及丙二醛(MDA)的含量。结果表明：WSAP和APS在一定浓度下对肉仔鸡外周血液和脾脏中淋巴细胞均有不同程度的抗氧化作用，能显著提高其T-AOC，增加其T-SOD、GSH-Px活性，抑制其羟自由基、超氧阴离子自由基的产生，从而减少MDA的生成，且对体外淋巴细胞的抗氧化作用有一定的剂量-效应关系，WSAP以15μg/mL浓度的效果最好，APS以100、200μg/mL效果较好。表明WSAP和APS提高肉仔鸡淋巴细胞的抗氧化作用可能是其发挥免疫作用的机制之一。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:符号说明

声明

前言

第一章文献综述

1自由基

1.1自由基的概念

1.2自由基的来源

2自由基与机体抗氧化系统

2.1 SOD

2.2 GSH-Px

2.3 CAT

3多糖的抗氧化功能

3.1植物多糖

3.2真菌多糖

3.3海藻多糖

4多糖抗氧化机理

5自由基反应与机体免疫的关系

6研究目的和内容

6.1研究目的

6.2研究内容

第二章试验研究

试验一WSAP和APS多糖含量的测定及体外抗氧化活性的研究

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

4小结

试验二WSAP和APS对肉仔鸡抗氧化性能的影响

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

4小结

试验三WSAP和APS对肉仔鸡淋巴细胞抗氧化活性的影响

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

4小结

第三章结论

第四章本研究的创新点与不足

参考文献

致谢

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