金省异黄素治疗Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠的实验研究及其机制探讨

摘要

目的：
　　 本实验通过给予RA动物模型Ⅱ型胶原诱导型关节炎(collagen typeⅡ-inducedarthritis，CIA)大鼠金雀异黄素(genistein，Gen)，甲氨蝶呤(methotrexate，MTX)及两者联合的治疗，观察其对CIA大鼠的治疗作用，以探讨其作用的可能机制。
　　 研究对象：
　　 SD大鼠
　　 方法：
　　 首先，将40只大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、Gen治疗组、MTX治疗组和Gen+MTX治疗组，每组8只。除空白对照组外，各组大鼠用Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂注射诱导CIA建立大鼠模型。Gen治疗组造模次日开始用药，每天胃内灌注Gen混悬液1ml，剂量为30mg/(kg·d)；MTX治疗组造模后开始用药，每周胃内灌注0.2mg/kg；Gen+MTX治疗组两种药物联合应用；空白对照组和模型对照组每天灌注等量的生理盐水。然后，各组大鼠每日进行一次关节炎指数(arthritis index，AI)评分及后肢容积测定，并于造模后第6周，摄取大鼠关节X线片，然后处死大鼠，取膝关节用免疫组织化学法检测其滑膜的微血管密度(microvessles density，MVD)，并取血清用Western Blotting法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)和基质金属蛋白酶(matrixmetallopeptidase，MMP)-1、2、9的表达并计算相对含量。
　　 结果：
　　 1、CIA大鼠模型关节炎指数评分、后肢容积、关节X线片及关节滑膜组织病理情况与正常大鼠比较差异有统计学意义(P<0.05)，提示造模成功。
　　 2、各治疗组大鼠关节炎指数评分、后肢容积、关节X线片及关节滑膜组织病理情况较模型对照组减轻，Gen与MTX治疗组无明显差异，Gen+MTX治疗组的效果更佳。
　　 3、Gen和/或MTX可使CIA大鼠关节滑膜新生血管数目明显减少，同时还能降低血清中表达IL-1β、TNF-α、VEGF和MMP-1、2、9的表达(P<0.05)。
　　 结论：
　　 1、Gen和/或MTX对CIA大鼠有治疗作用，Gen+MTX治疗组的效果更佳。
　　 2、Gen和/或MTX对CIA大鼠的疗效可能是通过下调IL-1β、TNF-α的表达发挥抗炎作用以及通过下调VEGF和MMP-1、2、9的表达发挥抗滑膜血管新生的作用来实现的。