泰州地区犬肠道寄生虫调查及其防治药物效果的研究

摘要

随着社会经济的发展和人们生活水平的提高，养犬人数和犬养殖量逐年增加。犬感染寄生虫十分普遍，其中寄生于犬消化道的寄生虫最常见，常引起犬的腹泻、消瘦、贫血、生长受阻，犬的抗病能力降低，易诱发或传播其他疾病，甚至引起犬的死亡。此外，有些犬消化道寄生虫还是重要的人兽共患寄生虫，如犬弓首蛔虫（Toxocara canis）、狮弓蛔虫（Toxascaris leonina）和华支睾吸虫（Clonorchis sinensis）等。因此，掌握某一地区犬的消化道寄生虫感染情况及防治药物效果，不但可为犬寄生虫病的临床诊断和防治提供理论依据，而且对人体感染人兽共患寄生虫病的防控有重要现实意义。鉴于此，本文对泰州地区犬的消化道寄生虫感染情况进行了调查，对流行的犬球虫种类进行了分子生物学鉴定，并选用妥曲珠利和“快乐红糖（主要成分为磺胺间甲氧嘧啶钠和二甲氧苄胺嘧啶）”以及复方非班太尔片、伊维菌素分别对泰州地区感染的优势虫种犬球虫和犬弓首蛔虫进行了驱虫效力试验。本研究结果为泰州地区犬肠道寄生虫病的防治奠定了重要基础。 1.泰州地区犬消化道寄生虫感染情况的调查 对泰州市及周边地区5个养犬场、1个藏獒繁育中心、1个警犬养殖基地、部分宠物门诊犬、宠物交易市场和散养犬的621份粪样，分别采用饱和食盐水漂浮法、锦纶筛兜淘洗法和水洗沉淀法进行寄生虫检查。结果显示:共检出9种肠道寄生虫:犬弓首蛔虫(T.canis)、狮弓蛔虫（T.leonina）、钩虫(Ancylostoma spp.)、狐毛首线虫（Trichuris vulpis）、曼氏迭宫绦虫（Spirometra mansoni）、犬复孔绦虫（Dipylidium caninum）、华支睾吸虫（C.sinensis）、犬等孢球虫（Isospora canis）和俄亥俄等孢球虫（I.ohioensis）。寄生虫总感染率为33.01％(205/621)，优势虫种为犬弓首蛔虫(19.16％)和球虫(11.27％)。4～6月龄犬的寄生虫感染率最高(54.39％)，其次是1～3月龄犬(43.88％)。夏季（6～8月份）的寄生虫感染率最高，达43.52％。散养犬寄生虫的感染率(40.32％)略高于圈养的犬(33.20％)。犬蛔虫的平均感染强度最高，每克粪便虫卵数达8.6×103个。对18只散养犬和4只圈养犬进行寄生虫学剖检，发现寄生虫感染率达72.73％，其中蛔虫的感染率最高，达45.45％。结论:犬消化道寄生虫的感染与犬只年龄、季节和饲养方式有直接关系。 2.犬球虫种类的分子生物学鉴定 对初步分离鉴定的1株犬等孢球虫（编码为TZ-IC）和2株俄亥俄等孢球虫（分别编码为TZ-OS和TZ-OH）的18S rRNA、ITS、28S基因分别进行PCR扩增，在克隆、测序、拼接、剪切、矫正后得到3条长度约2750 bp左右的序列;用DNAstar软件的CLUSTALW对三株犬球虫的18S、ITS1、ITS2序列进行分析，并与GenBank中亲缘关系相近的种属进行同源性比较，用MEGA5.05软件的NJ法和ML法构建系统发育树。结果显示:分离株TZ-IC、TZ-OH和TZ-OS的18S序列的同源性超过99％，其中OH和OS株间达99.9％，同源性最高;与囊等孢属（Cystoisospora）和等孢属（Isospora）的同源性为98.4％～99.9％;TZ-IC株与犬囊等孢球虫（C.canis，KT184360）的同源性达99.8％。在系统发育树中，三株球虫与囊等孢属和等孢属的球虫位于同一个分支，且犬等孢球虫分离株与犬囊等孢球虫形成一个小的分支;三株球虫与艾美耳属的关系最远。分离株TZ-IC、OH和OS的ITS1序列大小分别为582 bp、586 bp和584 bp，OS和OH株间亲缘关系较近，同源性达99.15％;OS株与犬的C.spp changchun1株的同源性最高，达99.5％。在系统发育树中，OS株、OH株和3株犬的俄亥俄囊等孢球虫位于同一分支;TZ-IC株与猫囊等孢球虫(C.felis，EU124689)构成一个分支，与OS和OH株的遗传距离较远。分离株TZ-IC、OH和OS的ITS2序列大小分别为435 bp、411 bp、411 bp，三者间同源性为91.1％，OH和OS的同源性为99.8％。在系统发育树中，OH、OS株与犬的俄亥俄囊等孢球虫位于同一分支，亲缘关系较近。结论:TZ-IC株为犬等孢球虫或犬囊等孢球虫，OS和OH株均为俄亥俄等孢球虫或俄亥俄囊等孢球虫，属同种不同株。 3.犬等孢球虫和俄亥俄等孢球虫的人工感染试验 分别将1500个/只（低剂量组）、15000个/只（高剂量组）个犬等孢球虫孢子化卵囊和俄亥俄等孢球虫孢子化卵囊感染12只（4组）30～40日龄幼犬，感染后每天观察犬的临床表现，用饱和糖盐水漂浮法检查粪便，并计数每克粪便卵囊数(OPG)，观察球虫的排卵囊规律;收集刚排出的卵囊进行孢子化培养，观察卵囊孢子化所需的时间。结果显示:犬感染15000个犬等孢球虫卵囊后第9d出现症状，主要表现为食欲不振，精神沉郁，排呈糊状、灰白色的粪便，出现水样粪便，并呈喷射状。犬感染15000个俄亥俄等孢球虫后第6d出现临床症状，其腹泻程度比犬等孢球虫高剂量组的轻。2种球虫的低剂量组感染后出现的腹泻程度轻，腹泻天数也短。犬等孢球虫的潜隐期为7～9 d;显露期为10～11 d（低剂量组）、21～22 d（高剂量组）。俄亥俄等孢球虫的潜隐期为3～4 d;显露期为11～13 d（低剂量组），24～25 d（高剂量组）。2种球虫的孢子化时间均为4d。 4.妥曲珠利触变型混悬液和“快乐红糖”对犬球虫防治试验 通过人工感染球虫的动物模型，分别在犬感染球虫后2d(预防)与排卵囊后(OPG＞1000治疗)用药，比较妥曲珠利触变型混悬液和“快乐红糖”对犬等孢球虫和俄亥俄等孢球虫的防治效果。结果显示:妥曲珠利触变型混悬液预防用药时，感染犬等孢球虫和俄亥俄等孢球虫的犬均未出现明显的腹泻，仅有1只犬排出少量卵囊;妥曲珠利触变型混悬液治疗用药时，受试犬仅排出少量稀软的粪便，给药1d后腹泻症状即消失，给药3～4 d后排卵囊数为零。快乐红糖预防用药时，感染犬等孢球虫和俄亥俄等孢球虫的犬均有不同程度的腹泻，腹泻率分别为25.88％和27.78％，但比阳性组犬的腹泻程度要轻;快乐红糖治疗用药时，对犬等孢球虫感染犬的效果相似与妥曲珠利，均在治疗后3d排卵囊数为零，但俄亥俄等孢球虫感染犬在治疗后第19d排卵囊数再为零。结论:妥曲珠利混悬液对犬球虫的预防和治疗效果均较好，而快乐红糖用于治疗犬球虫病效果较好，预防效果弱。 5.复方非班太尔片（拜宠清）和伊维菌素对犬弓首蛔虫驱虫试验 用伊维菌素和拜宠清分别对自然感染蛔虫的犬进行驱虫，以虫卵减少率和虫卵转阴率为指标判定驱虫效果，比较2种药物对犬蛔虫的驱虫效力。结果显示:从虫卵减少率和虫卵转阴率来看，第一次给药后第5d、第10d、第15d拜宠清组和伊维菌素组的虫卵减少率均超过95％，但在第一次驱虫15d后的虫卵转阴率均不能达到100％。在第一次驱虫后两周进行第二次驱虫，驱虫后5～10d虫卵转阴率均能达到100％。从排虫情况来看，伊维菌素组多在给药后第6～8 d排虫，拜宠清组多在给药后第2～4 d排虫。从剖检情况看，经两次驱虫，二者均能到达100％的驱净率。结论:伊维菌素和拜宠清对犬的蛔虫均有很好的驱虫效果。

目录

摘要

符号说明

前言

文献综述：犬消化道寄生虫病的病原学及其流行与防治

1常见犬消化道寄生虫病

2犬消化道寄生虫病的诊断

3犬常用驱消化道寄生虫药物

4犬消化道寄生虫病的防制措施

第一章泰州地区犬消化道寄生虫感染情况的调查

1材料和方法

2结果

3讨论

参考文献

第二章犬球虫种类的分子生物学鉴定

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

第三章犬等孢球虫和俄亥俄等孢球虫的人工感染试验

1材料和方法

2结果

3讨论

参考文献

第四章妥曲珠利触变型混悬液对犬球虫防治试验

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

第五章拜宠清和伊维菌素对犬弓首蛔虫驱虫试验

1材料与方法

2结果

3讨论

参考文献

全文总结

附录

致谢

攻读学位期间发表的学术论文

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