不育症与人精子膜蛋白ADAM基因表达、克隆和转基因细胞构建的研究

摘要

本研究运用循证医学的思路，首先根据收集的临床资料，对不育症患者的精液情况与致孕可能性进行统计学分析研究，采用SPSS分析软件，按照WHO的诊断流程图，对不育症的病因，精液指标与致孕的相关性进行统计，同时建立数据模型，对不育症患者致孕可能性进行前瞻性预测，从而对ART的选择提供指导。研究结果表明不育症病因以原因不明最多，其次为精索精脉曲张，说明对不育症的病因的研究还需进一步努力；精液指标相关性统计结果表明年龄为负相关，精液量，精子密度，精子活力为正相关，其中以A级精子的比例相关性最大，而传统的治疗方法，抗精抗体与受孕无相关性。说明目前尚没有确实有效的治疗不育症的方法，所以ART将是治疗不育的发展方向。在建立数据模型后，对不育症致孕可能性进行预测，结果表明此模型的平均预测正确率达78.9％，而其中以预测不会发生的正确性更高。从临床资料统计中，发现不明原因的不育占很大比例，而精子是受孕的关键。于是，应用RT-PCR方法，从人成熟精子中，检测目前被认为与精卵结合有关系的ADAM家族和CRISP家族基因的表达。实验结果表明在所选的ADAM家族基因中(ADAM1，2，3，7，10，15，32)，只有ADAM15在成熟精子中无表达，其余均有表达；而被认为是CRISP1家族基因的ARP基因也没有表达；作为精子标志物的PRM-2基因在所有标本中均有表达。　　综上所述，本研究运用循证医学的思路，从临床资料着手，科学客观对数据进行分析，并对成熟精子，睾丸、附睾不同时期，进行与生殖有关的ADAM家族、CRISP1家族和PRM-2基因表达测定，得到了这些基因的表达情况以及与不育症关系的结果，这些成果有一定的创新性，特别是对新基因ADAM32从人成熟精子上克隆和转基因细胞构建成功，在国内外均未见报道，具有独创性和先进性，为研究生殖的奥秘奠定了良好的物质基础。

目录

文摘

英文文摘

缩写词表

研究背景

第一部分不育症的精液情况与致孕可能性的统计学分析研究

材料与方法

结果

讨论

第二部分人类成熟精子中ADAM家族基因的表达

第三部分不育症患者中ADAM基因的表达和临床意义

第四部分ADAM家族基因在人类不同年龄睾丸附睾中的表达和意义

第五部分人精子膜蛋白ADAM32基因的克隆、转基因细胞构建的研究

一、主要仪器、试剂和标本

二、实验方法

三、实验结果

四、讨论

参考文献

结 论

硕士期间发表的论文

致 谢

附 录

可能引起不育症的基因

ADAM1全长基因

ADAM2全长基因

ADAM3全长基因

ADAM7全长基因

ADAM10全长基因

ADAM15全长基因

ADAM32全长基因

PRM-2全长基因

ARP全长基因