解毒维康片抑制HL-60白血病细胞增殖的实验研究

摘要

目的:研究解毒维康片(JDWKP)对白血病细胞HL-60增殖、凋亡及分化的影响，并观察其对凋亡相关因子Bcl-2和c-myc基因mRNA表达水平及血管内皮生长因子的影响，探讨解毒维康片抗白血病的作用机制，为其在临床应用治疗急性白血病提供理论依据。 方法:首先采用血清药理学的实验方法，从大鼠中制备解毒维康片的含药血清，采用MTT检测方法，观察JDWKP对HL-60细胞增殖的影响；采用DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术(FCM)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量测定Bcl-2、c-myc mRNA表达水平等，观察JDWKP对HL-60细胞凋亡及其凋亡相关因子的影响；采用NBT还原试验及肿瘤细胞体外集落培养试验，观察JDWKP对HL-60细胞分化的影响；采用酶联免疫吸附法(ELASA)，观察JDWKP对HL-60细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。 结果:①解毒维康片可明显抑制HL-60细胞的增殖并呈时间一剂量效应。②琼脂糖凝胶电泳显示，JDWKP可诱导HL-60细胞出现明显的凋亡“梯状”条带，下调凋亡相关因子Bcl-2，c-myc mRNA表达水平。③NBT还原试验及体外集落培养试验显示，低、中剂量JDWKP可诱导HL-60细胞分化，并且随着细胞分化，集落形成能力下降。④JDWKP可降低HL-60细胞培养上清液中VEGF表达水平。 结论:解毒维康片含药血清可抑制HL-60细胞的增殖、诱导其凋亡，并促进其分化，这可能与其能够下调凋亡相关因子Bcl-2、c-myc mRNA表达水平、诱导细胞分化以及抑制血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平相关。

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文摘

英文文摘

论文说明：中英文缩略词表

声明

前言

第一部分含药血清制备的优选试验及对HL-60细胞的增殖抑制

第二部分解毒维康片对HL-60细胞凋亡及分化的影响

第一节解毒维康片对HL-60细胞凋亡的影响

第二节解毒维康片对HL-60细胞分化的影响

第三部分解毒维康片对HL-60白血病细胞VEGF表达的影响

结论

参考文献

综述 中药血清药理学的研究方法及其应用

攻读硕士学位期间发表的论文

致谢