BCG干预对哮喘干细胞因子、巨噬细胞集落刺激因子表达影响的实验研究

摘要

通过观察哮喘小鼠干细胞因子(stem cell factor,SCF)、巨噬细胞集落刺激因子(macrophagecolony-stimulating factor,M-CSF)及白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)表达的变化以及卡介苗(bacillus calmette-guerin,BCG)干预的影响，了解SCF、M-CSF在哮喘发病中的作用，探讨BCG抗哮喘气道炎症可能的机制。 方法： 健康雄性昆明小鼠30只，随机分成三组，每组10只。①哮喘组：每只小鼠用10μg卵清蛋白(ovalbumin,OVA)和1mg氢氧化铝(Al(OH)3)腹腔注射进行致敏，1％OVA雾化吸入激发建立小鼠哮喘模型。②BCG干预组：OVA致敏、激发方法同哮喘组，在OVA致敏前7、3、1天每只小鼠皮内注射BCG 0.025mg。③对照组：用同等剂量的生理盐水(NS)代替OVA进行腹腔注射和雾化吸入。所有小鼠于末次雾化吸入24小时后取材，收集支气管肺泡灌洗液(bronchoal veolar lavage fluid,BALF)进行细胞总数、嗜酸性粒细胞(eosinpohils,EOS)计数；采用酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)方法检测BALF及骨髓冲洗液中SCF、M-CSF以及BALF中IL-12的水平；肺组织切片行苏木素-伊红(HE)染色，观察病理学改变；采用免疫组织化学图象分析技术测定肺组织中SCF、M-CSF蛋白的表达。 结果： 1．肺组织病理学分析：哮喘组肺组织中可见大量的炎性细胞浸润，BCG干预组炎性细胞浸润较哮喘组显著减轻，对照组未见明显炎性细胞浸润。 2．哮喘组、BCG干预组BALF中细胞总数、EOS计数均较对照组明显增高。BCG干预组与哮喘组比较，细胞总数、EOS计数有明显下降。 3．与对照组比较，哮喘组小鼠肺组织及BALF中的SCF表达均增多。BCG干预组与哮喘组比较，肺组织及BALF中的SCF表达均无显著变化。哮喘组肺组织及BALF中的SCF表达均与BALF中EOS计数呈正相关。 4．哮喘组小鼠肺组织及BALF中的M-CSF表达较对照组均显著增高，BCG干预组与哮喘组比较，肺组织及BALF中的M-CSF表达均下降。 5．哮喘组小鼠BALF中IL-12较对照组明显下降，BCG干预组与哮喘组比较IL-12水平上升。哮喘组BALF中M-CSF与IL-12水平呈负相关，BCG干预组BALF中M-CSF与IL-12水平亦呈负相关。 6．三组小鼠骨髓中均有SCF、M-CSF表达，但三组间差异无统计学意义。 结论： 1．早期给予BCG干预能够显著抑制哮喘小鼠气道EOS的浸润，但无法完全消除哮喘小鼠的气道炎症。 2．哮喘小鼠SCF、M-CSF表达增多，SCF、M-CSF均参与了哮喘变应性炎症的形成。 3．BCG通过抑制M-CSF的表达，促使IL-12表达增多，发挥抗哮喘气道炎症的作用。 4．小鼠骨髓中SCF、M-CSF表达无显著变化，哮喘状态下肺局部增多的SCF、M-CSF可能对哮喘起着更为重要的作用。

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文摘

英文文摘

论文说明：英汉双解缩略词表

声明

前言

第一部分BCG干预对哮喘小鼠干细胞因子表达的影响

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分BCG干预对哮喘小鼠巨噬细胞集落刺激因子、IL-12表达的影响

材料与方法

结果

讨论

参考文献

结论

综述尾加压素Ⅱ在呼吸系统的生物学效应

攻读学位期间发表的论文

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