斜纹夜蛾复合生物杀虫剂的研究及SpltMNPV-JP-B基因pif-2的克隆与序列分析

摘要

斜纹夜蛾(Spodoptera litura Fabricius)是蔬菜、绿化植物和各类农作物的重要害虫，近年来在各地发生普遍，且为害十分严重。由于化学农药的大量使用与施用方法不当，造成了斜纹夜蛾的抗药性明显上升，给防治带来很大困难。滥用化学农药不但污染环境，破坏生态平衡，而且对人畜健康造成严重危害。因此，在害虫的综合治理中，努力减少化学农药的使用量，大力推广生物防治，是农业可持续发展的需要。 斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedrovirus，SpltMNPV)是一种病原生物，对宿主种群具有明显的控制作用，目前已经商品化生产。但是，由于病毒具有很强的寄主专一性，对靶标生物之外的其他害虫没有作用，而且病毒对害虫防治的速效性较差，在实际应用中存在一定的不足。为了扩大生物农药的宿主域，提高其防治害虫的速效性，我们采用SpltMNPV与甲维盐复合的方式，通过室内毒力测定和大田防治试验，取得了较明显的结果。同时，在分子水平上，对SpltMNPV与经口感染有关的pif-2基因进行克隆与序列分析。主要工作成果如下： 1.在实验室条件下将SpltMNPV的中国株(CN)、3个日本株(A、B、C)与甲维盐进行混合复配，在不同组合、不同浓度、不同温度的条件下，分别测定它们对斜纹夜蛾幼虫的毒杀效果。结果表明，SpltMNPV日本株B型106PIB／mL与1％甲氨基阿维菌素苯甲酸盐1000倍稀释液的复合农药有明显的生物活性，其LT50比甲维盐单剂缩短22.22％，比病毒单剂缩短44.44％，效果显著。 2.采用复合生物杀虫剂对斜纹夜蛾、小菜蛾和瓜绢螟等鳞翅目害虫大田防治试验的结果表明，复合生物杀虫剂药后4d和7d对斜纹夜蛾的校正防效分别为76.67％～88.48％和92.92％～96.30％，略高于甲维盐单剂的71.63％～84.16％和87.56％～92.77％；明显高于病毒单剂的21.95～45.13％和68.83％～86.11％。同时，复合生物杀虫剂可以兼治小菜蛾、瓜绢螟等鳞翅目害虫，在生产上有较大的实用价值。 3.在分子水平上，克隆了SpltMNPV日本株B型的pif-2基因，并对其进行核苷酸和氨基酸序列分析，进行了PIF-2蛋白的二级结构预测及分子系统发育分析。为这一病毒杀虫剂的改良和深入研究奠定了良好的基础。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

第一篇文献综述

第一章斜纹夜蛾的生物防治研究

1自然天敌防治

2生物农药防治

3昆虫激素防治

4生物技术手段防治

5寄主植物品种对昆虫诱导抗药性的研究

6小结与讨论

参考文献

第二章昆虫杆状病毒的研究进展

1杆状病毒的生物学特性

2 pif基因的作用

3杆状病毒基因工程技术的发展

参考文献

第二篇斜纹夜蛾复合生物杀虫剂的研究

第三章斜纹夜蛾NPV的室内毒力测定

1材料与方法

2结果与分析

3小结与讨论

参考文献

第四章斜纹夜蛾NPV与甲维盐复合生物杀虫剂的毒力测定

1材料与方法

2结果与分析

3小结与讨论

4复合生物农药的发展前景

参考文献

第五章斜纹夜蛾复合生物杀虫剂的田间防治试验

1材料与方法

2结果与分析

3小结与讨论

参考文献

第三篇斜纹夜蛾核型多角体病毒分子生物研究

第六章SpltMNPV-JP-B经口感染必需基因pif-2的克隆与序列分析

1材料与方法

2结果与分析

3小结与讨论

参考文献

结论

在读期间公开发表的研究论文

致谢