Re标记锡硫胶体的制备及其在荷瘤动物体内分布的实验研究

摘要

第一部分：188Re标记锡硫胶体的方法学研究 目的：建立188Re标记锡硫胶体的方法，并研究其稳定性和颗粒大小。 方法：1．标记药盒法：(1)改变加入硫胶体药盒(SC kit，供99mTc标记用)的188Re淋洗液体积，其余步骤按说明书，进行188R标记硫胶体的预实验；(2)改变标记条件，在药盒内单独依序加入0～lmlNa2S203'5H20(8mg/m1)和SnCL2·2H20(20mg/m1)进行188Re标记实验。2．自制法：按照SC kit成分配制试剂，其他标记条件不变，单一依序改变以下实验条件：①改变Na2EDTA'2H20(4.6mg/m1)体积从Oml至1.25ml；②改变Na28203'5H20(8mg/m1)体积从0～1.25m1：③改变SnCL2·2H20(20mg/m1)体积从0～lml；④加入淋洗液后以浓盐酸、氢氧化钠或磷酸盐缓冲液调节PH值；⑤改变反应时煮沸时间；⑥在不同时间点分别测定标记率。3、测定标记产物的稳定性和放射性胶体粒子直径大小。 结果：l.188Re标记锡硫胶体的最佳标记条件：(1)药盒法：SC Kit中加入0.5mlSnC12'2H20(20mg/m1)、0.25mlNa2S203'5H20(8mg/m1)。(2)自制法：整个反应体系中依序加入18.1mg明胶、0.5mlNa2EDTA'2H20、0.5mlNa28203'5H20、0.5mlSnCL2H20，并加入浓盐酸将煮沸前反应体系PH调至1.0，煮沸时间为20min。2．药盒法和自制法标记产物的的最高标记率分别为(99.79±0.31)％、(99.81±0.06)％：两者差异无统计学意义，标记物在生理盐水中放置72h后放化纯仍为(93.23±0.64)％；胶体颗粒的直径范围分别为(10.83±6.60)gm(D10)，(44.91～14.46)μm(D50)，(235.29±126.61)μm（D90)。 结论： 188Re标记锡硫胶体方法简便、标记率高，标记物稳定性良好，能产生较大颗粒的放射性胶体粒子。 第二部分：188Re标记锡硫胶体在荷瘤动物体内分布的实验研究目的观察188Re标记锡硫胶体在荷瘤动物体内的生物学分布，探讨其用于实体肿瘤放射治疗的可行性。 方法：按第一部分方法，制备高标记率，稳定有效的188Re-SnSC。两种途径观察药物分布；1经皮肝动脉灌注:荷VX2肝肿瘤兔模型在DSA下经皮肝动脉分别注入约0.5ml(74～185MBq)188Re-SnSC(2组，n=3)和游离188ReO4-(1组，n=3)；2直接瘤内注射：荷人胰腺癌裸鼠，瘤体中心部位分别直接瘤内注射0.05ml(0.05～0.1mCi)188Re-SnSC(7组，n=4)和游离188ReO4-(5组，n=4)。 以上两种肿瘤动物模型均在规定时间点采集SPECT图像，并处死动物取出肿瘤、肝脏、血液等组织称重并计算每克组织百分注射计量(％ID/g)。 结果：1经皮肝动脉灌注组：注射188Re-SnSC和游离l88ReO4-1h后，肿瘤组织％ID/g为(23.342±11.452)％和(0．713±0.479)％，肿瘤与肝脏的％ID/g之比分别为70．887±19.578、2.280±1.155；注射188Re-SnSC后24h，肿瘤组织％ID/g和肿瘤与肝脏的％ID/g之比分别为(8.176±6.836)％、17.419±13.957。2直接瘤内注射组：瘤内注射188Re-SnSC后0.5h、1h、4h、24h，肿瘤组织的％ID/g分别为(89．53±18.76)％、(104.31±36.72)％、(105.76±39.30)％、(86.22±18.47)％，注射188Re-SnSC后7d，肿瘤组织的％ID/g为(0．323±0.072)％；瘤内注射游离188ReO4-后0.5h、1h、4h、24h，肿瘤组织的％ID/g分别为(17.72±2.46)％、(10.53±3.57)％、(6.24±2.59)％、(0．026±0.003)％。 结论： 188Re标记锡硫胶体动脉和瘤内注射后主要聚集在肿瘤组织，滞留时间长，有望用于实体肿瘤的放射性核素治疗。 第三部分：188Re标记锡硫胶体对胰腺癌细胞的杀伤效应目的观察188Re标记锡硫胶体对胰腺癌细胞生长的抑制作用。 方法： 1按第一部分方法，制备高标记率，稳定有效的188Re-SnSC，标记完成后室温下放置30min冷却后备用。2每孔体积200μl，1×104个胰腺癌细胞单个细胞悬液接种于96孔培养板中；188Re-SnSC组按不加药物、0.01、0.025、0.05mCi分为4列，188ReO4-组按不加药物、0.01、0.05mCi分为三列，每列8个复孔，每天一块培养板，共7块板。MTT法测每列各孔的光吸收值(A)，绘制细胞生长曲线，计算药物对细胞的抑制率。 结果：在1～5天内188Re-SnSC对细胞的抑制作用随放射性药物剂量和照射时间的增加而增大。0.05mCi188Re-SnSC组加药后1、3、5、7天抑制率分别为(33.70±3.74)％、(89.8±1.21)％、(97.43±0.59)％、(92.2±1.18)％，最大抑制率可达(98.09±0.58)％。 结论：在细胞实验中，188Re-SnSC和188ReOn4-均对胰腺癌生长有明显的抑制。

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文摘

英文文摘

论文说明：英文缩写词释表

声明

第一部分：188Re标记锡硫胶体的方法学研究

材料与方法

结果与分析

讨论

结论

参考文献

第二部分：188Re标记锡硫胶体在荷瘤动物体内分布的实验研究

材料与方法

结果与分析

讨论

结论

参考文献

第三部分：188Re标记锡硫胶体对胰腺癌细胞的杀伤效应

材料与方法

结果与分析

讨论

结论

参考文献

综述 肿瘤的局部放射性核素治疗与188Re标记胶体的运用

攻读学位期间公开发表的论文

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