NADPH氧化酶在心梗后大鼠心室肌中的改变及其干预研究

摘要

目的：探讨心梗后大鼠左室心肌组织中NADPH氧化酶的变化及夹竹桃麻素对NADPH氧化酶干预作用的机制。
　　 方法：取雄性SD大鼠，通过结扎左冠状动脉前降支建立大鼠心肌梗塞模型，假手术组为无创缝线只穿过前降支而不结扎，将两组再随机分为药物干预组和安慰剂组两个亚组，术后第二天分别给予等体积的夹竹桃麻素溶液（15mg/kg/day）和生理盐水灌胃，共五周。分别于术前和术后第六周行心超检查。术后第六周处死大鼠，取出心脏，用左心室非梗塞心肌组织制备心肌匀浆液，采用吸收光度法测定非梗塞区心室肌组织中O2-浓度和NADPH氧化酶活性，采用RT-PCR法测定心室肌组织中NADPH氧化酶亚单位gp91phoxmRNA的表达水平，并观察心室肌组织中O2-浓度与NADPH氧化酶活性和gp91phoxmRNA表达水平的相关性。
　　 结果：1.假手术组大鼠心室肌组织中O2-浓度为（50300±3416）RLU/mg蛋白，心梗组O2-浓度为（83200±7582）RLU/mg蛋白，与假手术组相比有显著统计学差异（P<0.01）。心梗药物干预组O2浓度为（53300±551.7）RLU/mg蛋白，与心梗组相比具有统计学差异（P<0.05），但与假手术组相比无统计学差异（P=0.45）。假手术药物干预组O2-浓度为（47100±2126）RLU/mg蛋白，与假手术组相比无统计学差异（P=0.41）。
　　 2.假手术组大鼠心室肌组织中NADPH氧化酶活性为（3.38±0.35）RLU/mg蛋白，心梗组NADPH氧化酶活性为（4.77±0.46）RLU/mg蛋白，与假手术组相比有显著统计学差异（P<0.01）。心梗药物干预组NADPH氧化酶活性为（3.62±0.32）RLU/mg蛋白，与心梗组相比具有统计学差异（P<0.05），但与假手术组相比无统计学差异（P=0.27）。假手术药物干预组NADPH氧化酶活性为（3.19±0.32）RLU/mg蛋白，与假手术组相比无统计学差异（P=0.37）。
　　 3.假手术组大鼠心室肌组织中NADPH氧化酶亚单位gp91phoxmRNA表达水平为（0.46±0.07），心梗组gp91phoxmRNA的表达水平为（0.69±0.06），与假手术组相比有显著统计学差异（P<0.01）。心梗药物干预组gp91phoxmRNA的表达水平为（0.49±0.06），与心梗组相比具有统计学差异（P<0.05），与假手术组相比无统计学差异（P=0.54）。假手术药物干预组gp91phoxmRNA表达水平为（0.44±0.03），与假手术组相比无统计学差异（P=0.64）。
　　 4.心室肌组织中O2-浓度与NADPH氧化酶活性有显著相关性（R=0.73，P<0.01），与NADPH氧化酶亚单位gp91phoxmRNA表达水平有显著相关性（R=0.80，P<0.01）。
　　 结论：1.心梗组大鼠心室肌组织中O2-浓度、NADPH氧化酶活性和gp91phoxmRNA表达水平明显增高，NADPH氧化酶活性和gp91phoxmRNA表达水平与O2-浓度升高水平呈显著相关，表明心梗后NADPH氧化酶系统被激活。
　　 2.夹竹桃麻素通过显著抑制NADPH氧化酶活性和gp91phoxmRNA表达减少O2-生成，提示夹竹桃麻素作为NADPPH氧化酶抑制剂可显著减轻心梗后心肌组织氧化应激水平。