P-CREB1在七氟烷对不同性别成年大鼠学习记忆影响中的作用

摘要

目的：
　　 观察吸入七氟烷对不同性别成年大鼠学习记忆的影响，和对海马神经元p-CREB1蛋白及其介导转录的凋亡蛋白表达的影响，探讨七氟烷对成年大鼠学习记忆损害的可能机制。
　　 方法：
　　 健康成年SD大鼠64只，经开放实验、避暗实验及Morris水迷宫行为学筛选出58只，随机分为4组：雌性对照组（Fc组，n=15）、雌性七氟烷组(Fs组，n=15)、雄性对照组（Mc组，n=14）和雄性七氟烷组（Ms组，n=14）。Fs组和Ms组吸入3％七氟烷2h，Fc组和Mc组吸入95％氧气2h。分别在停止给药后1、30、60、90d进行自发活动实验；停止给药后2、30、60、90d进行避暗实验；停止给药后3～7d、31～35d、61～65d和91～95d进行Morris水迷宫实验。Westen blot法分别检测Morris水迷宫结束后第7d和第95d海马神经元p-CREB1、Bcl-2、Caspase-8和Caspase-3的表达水平。
　　 结果：
　　 开放实验：停止吸入七氟烷后1d，与Fc组比较，Fs组活动总路程减少，平均速度减慢（P＜0.05）；与Mc组比较，Ms组活动总路程减少，平均速度减慢。
　　 避暗实验：各组间潜伏期及错误次数相互比较，差异无统计学意义（P＞0.05）
　　 Morris水迷宫实验：与Fc组比较，Fs组在停止吸入七氟烷后第1d和第31d时游泳总路程增加，逃避潜伏期延长（P＜0.05）；与Mc组比较，Ms组在停止吸入七氟烷后第3～6、31～34、61d时游泳总路程增加，逃避潜伏期延长（P＜0.05）；与Fs组比较，Ms组在停止吸入七氟烷后第4～6、34d时游泳总路程增加，逃避潜伏期延长（P＜0.05）。
　　 Western blot结果：停止吸入3％七氟烷2h后第7d，与Fc组比较，Fs组p-CREB1和Bcl-2蛋白表达下调，Caspase-8及Caspase-3表达上调（P＜0.05）；与Mc组比较，Ms组p-CREB1和Bcl-2表达下调，Caspase-8及Caspase-3表达上调(P＜0.05)；与Fs组比较，Ms组p-CREB1和Bcl-2表达下调（P＜0.05）。停止吸入七氟烷后第95d，p-CREB1、Bcl-2、Caspase-8和Caspase-3的表达水平差异无统计学意义。
　　 结论：
　　 吸入3％七氟烷2h可致成年雌性大鼠31d内，雄性大鼠62d内学习记忆损害，且对大鼠的学习记忆具有可逆性影响。其损害机制可能与抑制成年大鼠海马神经元p-CREB1蛋白表达，引起下游蛋白Bcl-2蛋白表达下降，Caspase-8蛋白和Caspase-3蛋白表达上调，促进海马神经元凋亡有关。