Ataxin-1在人恶性肿瘤细胞中的表达及对放射敏感性的影响

摘要

目的：检测20种肿瘤细胞系中Ataxin-1表达水平，并探讨电离辐射对脑胶质瘤和肺癌细胞株中Ataxin-1表达水平的影响。通过建立Ataxin-1稳定高表达的肺癌细胞株，研究Ataxin-1在体外对肺癌细胞放射敏感性的影响。
　　方法：采用Westernblot法检测包括脑胶质瘤、肺癌、宫颈癌、乳腺癌及前列腺癌的20种肿瘤细胞株中Ataxin-1蛋白的表达水平。选取部分肿瘤细胞株给予X射线照射，采用Westernblot及RT-PCR（反转录PCR）法检测受到不同剂量电离辐射及照射后不同时间的肿瘤细胞中Ataxin-1表达水平。通过脂质体介导的重组质粒转染及G418筛选，建立Ataxin-1基因肺癌细胞NIH-H226与NIH-H441的高表达稳定转染株，采用克隆形成实验检测Ataxin-1对肺癌细胞电离辐射后克隆形成能力的影响。
　　结果：检测的20种肿瘤细胞内均有Ataxin-1表达，但Ataxin-1蛋白的表达水平存在明显差异；Westernblot与PCR检测均显示，肿瘤细胞在受到不同剂量的X射线照射后24h，其Ataxin-1蛋白及mRNA表达量均明显增加，并随电离辐射剂量的增加而显著；不同时间检测提示，细胞在X射线照射4h后Ataxin-1蛋白及mRNA的表达量即开始上升，并持续到照射后24h；成功构建肺癌NIH-H226与NIH-H441的Ataxin-1稳定转染株，Westernblot实验证实转染细胞中Ataxin-1蛋白表达水平较母细胞明显增加。克隆形成实验发现NIH-H226/Ataxin-1与NIH-H441/Ataxin-1细胞存活曲线明显低于相应母细胞。
　　结论：
　　1.Ataxin-1在不同肿瘤细胞中表达水平存在明显差异；
　　2.电离辐射可以诱导Ataxin-1在脑胶质瘤及肺癌细胞中的表达；
　　3.Ataxin-1高表达增加肺癌细胞NIH-H226与NIH-H441的放射敏感性。

目录

封面

声明

中文摘要

英文摘要

目录

前 言

参考文献

第一部分 部分肿瘤细胞内Ataxin-1表达水平及其与电离辐射的关系

材料和方法

实验结果

讨 论

参考文献

第二部分 Ataxin-1高表达人肺癌细胞株H226与H441的建立及其对放射敏感性影响的体外研究

材料与方法

实验结果

讨 论

参考文献

全文小结

综 述

参考文献

攻读学位期间学术活动总结

中英文缩略词表

致谢