细胞支架复合体促进大鼠腹部预构皮瓣存活及其再血管化的实验研究

摘要

目的:探讨通过构建大鼠羊膜上皮细胞胶原海绵支架复合体,观察预构皮瓣血管束附近细胞支架复合体的作用,及其对预构皮瓣成活影响的实验研究。
　　方法:体外培养羊膜上皮细胞,将第3代的大鼠羊膜上皮细胞与胶原海绵构筑成细胞支架复合体后,光镜下及荧光标记法分别观察细胞种植前后的生长增殖情况;ELISA法检测羊膜上皮细胞支架上清液中VEGF、bFGF、TGF的含量,并通过荧光标记技术观察羊膜上皮细胞支架植于体内后细胞的存活情况;同时将软骨细胞植于胶原蛋白海绵支架。实验分为空白对照组、软骨细胞组、羊膜上皮细胞组和正常对照组。一期手术时,空白对照组在预构皮瓣血管神经束的两侧植入胶原海绵空支架,软骨细胞组和羊膜上皮细胞组均植入带有相应细胞的胶原海绵支架复合体。术后第7、14天各组分别取皮瓣组织行促血管生成因子的ELISA检测。二期手术时,将皮瓣四边掀起后原位缝合,术后1周比较各组皮瓣存活情况,并取存活部位软组织测定微血管数目及密度,进行分析。正常对照组大鼠未经任何手术过程,当其它三组大鼠分别经过两期手术后,正常对照组大鼠取腹部相应位置的皮肤软组织作相关指标的检测。
　　结果:羊膜上皮细胞在胶原海绵支架上生长情况良好,细胞支架上清液中VEGF、bFGF、TGF的含量随时间增长呈不断上升趋势,将细胞支架移植于体内后经过观察发现细胞仍存活良好。组织内各因子含量以羊膜上皮细胞组最高,其余依次为正常对照组、空白对照组及软骨细胞组,各组之间均有差异。并且各组14天较7天的分泌量无明显下降。空白对照组与软骨细胞组间皮瓣存活率无统计学差异,而羊膜上皮细胞组明显高于前两组。正常对照组、空白对照组及软骨细胞组间皮肤微血管密度无显著差异,而羊膜上皮细胞组明显高于前三组。
　　结论:羊膜上皮细胞在胶原海绵支架上及体内移植后生长情况良好,植入羊膜上皮细胞胶原海绵复合体可明显促进预构皮瓣的存活,与其分泌的一些促血管生成因子促进预构皮瓣的血管新生有关。

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序言

材料和方法

一、实验试剂和器材

二、实验方法

三、统计学处理

结果

1．1 大鼠羊膜上皮细胞体外培养的形态

1．2 AECs在胶原蛋白海绵支架上的生长情况

1.3 羊膜上皮细胞支架复合体体外分泌VEGF、TGFβ1、bFGF：

1.4 大鼠羊膜上皮细胞支架复合体行体内移植后细胞的成活情况：

讨论

结论

参考文献

综述

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