miR-145对前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡及其调控基因表达的影响

摘要

目的:研究miR-145对前列腺癌PC-3细胞系增殖和凋亡及其调控基因表达的影响。
　　方法:常规培养前列腺癌PC-3细胞株,实验分为3组:不做任何处理的PC-3细胞为空白对照组,仅转染不表达miR-145的空白病毒载体为阴性对照组,转染有表达miR-145的慢病毒载体为mir-145转染组。感染后72h,荧光显微镜下观察细胞,判断细胞的感染效率,荧光定量PCR检测miRNA-145的表达情况,用MTT法检测前列腺癌PC-3细胞的增殖能力,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR检测预测的miR-145调控基因(C-MYC, IRS1,IGF1R,CDKN1A,CCNA2)的表达变化。
　　结果:72小时后荧光显微镜下观察细胞转染效率达80％。荧光定量PCR结果显示:miR-145转染组的miR-145表达水平较阴性对照组、空白对照组明显上调(p<0.05)。MTT结果显示,miR-145转染组的细胞增殖活性明显低于空载体组和空白对照组。流式细胞仪检测显示,过表达miR-145后,PC-3细胞的细胞凋亡率增高。RT-PCR结果显示miR-145转染组IRS1 mRNA表达明显降低(P<0.05)。
　　结论: miR-145可以抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖,诱导细胞凋亡。前列腺癌PC-3细胞中miR-145表达可使IRS1基因表达降低。

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引言

第一部分 转染 miR-145 对PC-3细胞增殖和凋亡的影响

1 材料与方法

1.1材料

1.2 方法

1.3 统计学处理

2 结 果

2.1 荧光显微镜下观察慢病毒转染细胞效率

2.2 PC-3 细胞转染慢病毒后miR-145的含量变化

2.3 MTT法检测过表达miR-145对PC-3细胞增殖的影响

2.4 流式细胞仪检测miR-145对PC-3细胞凋亡的影响

3 讨 论

参考文献

第二部分 miR-145对相关调控基因表达的影响

1 材料与方法

1.1 主要试剂及仪器

1.2 实验方法

1.3 统计学处理

2 结 果

3 讨 论

结论

参考文献

综述

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