低剂量序贯释放BMP-2和VEGF的丝素蛋白/纳米羟基磷灰石支架的制备和促成骨研究

摘要

目的：
　　通过微流体泵及冷冻干燥技术制备能低剂量序贯释放骨形态发生蛋白2（BMP-2）和血管内皮生长因子（VEGF）的复合支架，并研究其促成骨能力。
　　方法：
　　通过微流体泵制备丝素微球，使用化学和物理方法分别吸附BMP-2和VEGF，混入丝素和羟基磷灰石溶液中冻干制得复合支架。通过扫描电镜（SEM）和红外光谱（FTIR）对复合支架进行表征。通过ELISA法研究BMP-2和VEGF在不同时间点的释放情况。将复合支架与成骨细胞（MC3T3-E1）共培养，通过SEM、CCK-8、碱性磷酸酶（ALP）活性测定及钙结节含量测定，研究复合支架对成骨细胞的黏附增殖及分化的影响。将复合支架置入大鼠颅骨缺损模型中，通过μ-CT、H&E染色、MASSON染色及CD31染色，研究其促成骨能力。
　　结果：
　　第1、10及28天，BMP-2释放量为6.7±0.1％、13.7±0.4%及15.5±0.6%；VEGF释放量为48.7±1.8%、66.4±2.3%及67.9±2.3%。复合支架与成骨细胞共培养，细胞形态良好，ALP活性及产生的钙结节含量较对照组明显增多。在颅骨缺损模型中，复合支架的新生骨含量（BV/TV）远高于对照组，且能观察到骨性连接。
　　结论：
　　复合支架在28天内能效缓释BMP-2，并在10天内快速释放VEGF，模仿骨组织修复过程。复合支架拥有良好的生物相容性，能促进成骨细胞的黏附增殖及分化，且在大鼠体内有明显促进成骨的能力。

目录

声明

前言

第一部分 低剂量序贯释放BMP-2和VEGF的丝素蛋白/纳米羟基磷灰石支架的制备及相关理化性质分析

材料与方法

结果

讨论

结论

第二部分 低剂量序贯释放BMP-2和VEGF的丝素蛋白/纳米羟基磷灰石支架对成骨细胞黏附增殖及分化的研究

材料与方法

结果

讨论

结论

第三部分 低剂量序贯释放BMP-2和VEGF的丝素蛋白/纳米羟基磷灰石支架在大鼠颅骨缺损模型中的研究

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

中英文缩略表

攻读学位期间发表的文章

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