补肾健脾方对2型糖尿病合并阿尔茨海默病大鼠氧化应激的影响

摘要

目的:建立2型糖尿病合并阿尔茨海默病大鼠模型，通过比较补肾健脾方大、中、小剂量组与复合模型组大鼠血糖、体重、氧化应激标志物及脑组织病理切片的差异，探讨补肾健脾方对T2DM合并AD的共同治疗作用及作用靶点。
　　方法:SPF级SD雄性大鼠80只，6周龄，体重200±20g，适应性喂养一周后开始实验。实验共分六组:空白组、复合模型组、假手术组、中药大剂量组、中药中剂量组、中药小剂量组。复合模型组为在T2DM造模成功的基础上，进一步制造AD模型。其中，T2DM造模方法为高腊喂养+腹腔注射STZ，AD造模方法为双侧海马CA1区注射Aβ1-42。假手术组为在T2DM造模成功的基础上，双侧海马CA1区注射等体积氨水。大、中、小剂量组分别为在复合模型基础上予补肾健脾方按24g/kg、12g/kg、6g/kg灌胃给药。治疗6周后全部大鼠处死，取血清及脑组织，分别测血清、海马、大脑皮质、小脑皮质的SOD活力、GSH-PX活力及MDA含量，脑组织病理切片做HE染色。实验过程中，每周测大鼠体重、血糖。
　　结果:1、成功建立T2DM合并AD复合模型。
　　2、血糖:中药大、中、小剂量组大鼠治疗6周后血糖较复合模型组有所下降，但无明显统计学差异(P＞0.05)。
　　3、体重:与空白组相比，复合模型组大鼠逐渐出现多饮、多尿、体重下降，同期比较两组间体重有统计学差异(P＜0.05)。中药大、中、小剂量组与复合模型组同期比较，体重增加(P＜0.05)，大、中、小剂量组组间比较有统计学差异，且呈量效性关系。
　　4、组间氧化应激指标:与空白组相比，复合模型组大鼠血清、海马、大脑皮质、小脑皮质SOD、GSH-PX活力下降(P＜0.01)，MDA含量升高(P＜0.01);与假手术组相比，复合模型组大鼠血清GSH-PX活力下降(P＜0.05)、MDA含量升高(P＜0.01)，海马SOD、GSH-PX活力下降(P＜0.05)、MDA含量升高(P＜0.01)，大脑皮质MDA含量升高(P＜0.05);中药大、中、小剂量组血清、海马、大脑皮质、小脑皮质SOD、GSH-PX活力较复合模型组升高(P＜0.05或P＜0.01)，MDA含量下降(P＜0.05或P＜0.01)，大、中、小剂量组组间比较有统计学差异，且呈量效性关系。
　　5、大鼠脑组织不同部位氧化应激:大鼠海马、大脑皮质、小脑皮质之间GSH-PX活力比较，小脑皮质＞大脑皮质＞海马，差异有统计学意义(P＜0.01)。大鼠海马、大脑皮质、小脑皮质之间SOD活力、MDA含量无显著差异(P＞0.05)。
　　6、病理切片:HE染色可见复合模型组海马区大量神经元呈多形性改变，细胞排列层次紊乱，出现神经元固缩、深染，并见凋亡小体。假手术组仅见细胞结构紊乱，神经元形态基本正常。中药大、中剂量组较复合模型组神经元形态、排列均有改善，且中药大剂量组改善更为明显，中药小剂量组改善不明显。
　　结论:1、高脂喂养+STZ腹腔注射可以成功复制T2DM模型，在此基础上双侧海马CA1区注射Aβ1-42，可以成功复制T2DM合并AD模型。
　　2、补肾健脾方，以补肾健脾、化痰祛瘀为治法，可以改善2型糖尿病合并阿尔茨海默病复合模型大鼠体重、脑组织病理及氧化应激损伤，考虑氧化应激是补肾健脾方干预T2DM、AD的共同作用靶点之一。

目录

声明

摘要

前言

第一部分 理论研究

一、中医学对老年2型糖尿病与老年痴呆及两病关系的认识

1 病因病机

2 证型分布

3 治疗进展

二 氧化应激与2型糖尿病及阿尔茨海默病的关系

1 氧化应激与衰老

2 氧化应激与2型糖尿病

3 氧化应激与阿尔茨海默病

三 现代医学对2型糖尿病与阿尔茨海默病两者之间关系的认识

1 糖脂代谢紊乱

2 胰岛素抵抗

3 氧化应激

4 炎症因子

5 铁代谢

第二部分 实验研究

一 材料与方法

1 材料

2 方法

二 结果

1 模型结果

2 大鼠一般情况

3 各组大鼠的血糖

4 各组大鼠体重

5 氧化应激结果

6 脑组织病理切片结果

三 讨论

1 补肾健脾方立法、主要药物及方义分析

2 补肾健脾方作用机制的探讨

3 本研究的创新点

4 不足与展望

结论

参考文献

附录

攻读硕士学位期间取得的学术成果

致谢