养精胶囊对Leydig细胞中VEGF及其受体、NO的影响

摘要

[目的]
　　观察养精胶囊提取液对MLTC-1细胞中VEGF及其受体、NO的影响。
　　[方法]
　　培养皿中细胞培养至对数生长期后，收集细胞，用胰酶消化，将细胞浓度调整为4×105/mL左右，分为空白、低、中、高剂量组（0 mg/mL、0.01 mg/mL、0.1 mg/mL、1 mg/mL）接种于6孔板内，设置为3复孔，待细胞丰度达到50％时，换取含养精胶囊提取物的培养液继续培养细胞。24小时后收集细胞，提取mRNA或蛋白，分别用RT-PCR和Western-Blot来分析VEGF及其受体、NO的表达情况。
　　[结果]
　　养精胶囊提取液作用于MLTC-1细胞24 h后，发现VEGF及FLK在mRNA水平低剂量组和空白组之间没有统计学差异，而高剂量组和中剂量组与空白组相比，差异显著;在蛋白水平，低、中、高剂量组与空白组相比均有显著差异。养精胶囊提取液作用于MLTC-1细胞24h后，发现eNOS在mRNA水平低剂量组和空白组之间没有统计学差异，而高剂量组和中剂量组与空白组相比，差异显著;在蛋白水平，低、中、高剂量组与空白组相比均有显著差异。
　　[结论]
　　养精胶囊提取液能够提高MLTC-1细胞中VEGF及其受体、NO的mRNA和蛋白表达，并且这种改变会随着剂量的增加而升高。随着VEGF及其受体、NO表达的升高，会对睾丸微循环起到一定的改善作用，从而促进微血管的生成，为精子的发生提供更好的微环境。

目录

声明

摘要

前言

第一部分 理论研究

1．VEGF的研究概况

1．1 VEGF的结构特征

1．2 VEGF的生物学功能

1．3 VEGF受体及其作用

1．4 VEGF及其受体对男性生殖的影响

2．NO的研究概况

2．1 NO及NOS的概述

2．2 NO的生物学功能

2．3 NO在男性生殖中的作用

3．补肾养血法与睾丸微循环

3．1 “精血同源”理论

3．2 精子发生调控与微循环

3．3 睾丸微循环障碍与不育症

3．4 VEGF及NO对睾丸微循环调控

4．补肾养血法治疗男性不育

第二部分 实验研究

1．实验材料

1．1 试剂

1．2 主要仪器设备

1．3 主要溶液的配制

2．养精胶囊提取液对MLTC-1细胞VEGF因子及其受体表达的影响

2．1 细胞培养

2．2 RT-PCR方法检测养精胶囊提取液对MLTC-1细胞VEGF因子及其受体的mRNA表达

2．3 Western-Blot方法检测养精胶囊提取液对MLTC-1细胞VEGF因子及其受体的蛋白表达

2．4 统计学方法

2．5 实验结果

3．养精胶囊提取液对MLTC-1细胞eNOS表达的影响

3．1 实验方法

3．2 统计学方法

3．3 实验结果

第三部分 讨论

1．养精胶囊方药研究

1．1 淫羊藿

1．2 熟地

1．3 黄精

1．4 紫河车

1．5 当归

1．6 水蛭

1．7 沙苑子

2．养精胶囊对Leydig细胞VEGF及其受体、NO的影响

3．补肾养血法与男性不育

结语

参考文献

附录

致谢