益气升提法治疗实验性自身免疫性重症肌无力大鼠免疫机制研究

摘要

目的: 探讨益气升提法治疗实验性自身免疫性重症肌无力(Experimental Autoimmune Myasthenia Gravis，EAMG)大鼠免疫机制。 方法: 1.采用鼠源乙酰胆碱受体(acetylcholinergic receptor，AChR)α亚基97-116肽段(Rα97-116)免疫方法构建实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)模型。 2.50只SPF级雌性Lewis大鼠，随机选择6只大鼠作为佐剂对照组，其余造模。评估确定模型成功36只，随机分为模型对照组、阳性药物对照组（强的松）、升陷汤组、益气升提组（黄芪、柴胡、升麻、桔梗）、益气组（黄芪），升提组（柴胡、升麻、桔梗）。灌胃一个月。 3.大鼠每周称重，观察大鼠临床表现、体重、低频重复电刺激(Reptitive Nerve Stimulation，RNS)衰减率。 4.用酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked ImmunoSorbent Assay，ELISA)，测定大鼠外周血血清因子IFN-γ、TGF-β、IL-4、IL-17及抗体AChR-Ab含量。 5.用流式细胞术(Flow Cytometry，FCM)，测定大鼠外周血淋巴细胞CD4+CD25+Foxp3+Treg比例。 结果: 1.造模后，造模大鼠与佐剂对照组比较，体重下降，肌无力症状明显，血清AChR-Ab含量显著升高(P＜0.01)，RNS衰减率显著增大(P＜0.01)，且均超过10％，证明造模成功。 2.经药物治疗后，与模型对照组比较，阳性药物对照组、升陷汤组、益气升提组大鼠临床症状好转，RNS衰减率均显著降低(P＜0.01或P＜0.05)，外周血血清AChR-Ab、IFN-γ、IL-4、IL-17水平显著下降，TGF-β水平升高(P＜0.01或P＜0.05);外周血淋巴细胞CD4+CD25+Foxp3+Treg比例显著升高(P＜0.05)。 结论:益气升提法可以有效改善EAMG大鼠临床症状，其机制可能是降低外周血血清IFN-γ、IL-4、IL-17含量，升高TGF-β含量，提高外周血淋巴细胞CD4+CD25+Foxp3+Treg比例，综合调节淋巴细胞网络因子，增强机体免疫抑制，减少机体免疫应答，恢复免疫平衡，减少AchR-Ab产生，降低血清AchR-Ab含量。

目录

声明

摘要

前言

第一部分理论研究

1．重症肌无力现代研究进展

1．1流行病学研究

1．2免疫学研究进展

1．3西医治疗进展

2．益气升提法与重症肌无力

2．1益气升提法的古代研究

2．2益气升提法的现代研究

2．3益气升提法治疗重症肌无力合理性及方剂选择

第二部分益气升提法治疗EAMG大鼠免疫机制研究

1．构建EAMG动物模型

1．1实验材料

1．2构建EAMG动物模型

1．3统计学处理

2．益气升提法治疗实验性自身免疫性重症肌无力大鼠免疫机制研究

2．1实验模型评估及分组

2．2经药治疗结束后检验内容

2．3统计学处理

3．实验结果

3．1 EAMG大鼠临床表现及一般状况

3．2实验指标检测

1．升陷汤拆方给药实验分析

2．益气升提法对EAMG大鼠治疗免疫机制

3．益气升提配伍药对疗效分析

第四部分结论

第五部分问题与展望

参考文献

附录

攻读硕士期间取得的学术成果

致谢