小菜蛾抗药性分子机理的探讨与分析

摘要

小菜蛾属鳞翅目菜蛾科,是世界性十字花科植物主要害虫,对小菜蛾的治理是一个世界性难题.目前的研究大多数仍处于生理生化水平,对抗药性的遗传和分子机理不甚清楚.从现在的研究看来,抗性的机制很复杂,涉及到行为变化、代谢酶类的变化、杀虫剂作用靶标的变化等,不同的杀虫剂产生抗性的机制也不同.该文以敏感品系、抗杀虫双品系、抗杀螟丹品系和抗溴氰菊酯品系小菜蛾为材料,采用神经电生理,放射性免疫结合和双向电泳等方法对小菜蛾抗药性的机理做了初步的研究.主要结果如下:1.采用常规的分子生物学方法分析了小菜蛾mariner转座子与抗药性的关系.在小菜蛾中发现了一种新的mariner转座子亚型,敏感品系和抗性品系在mariner转座子亚型水平上没有明显差异.2.采用神经电生理方法检测了杀虫双和杀螟丹两种杀虫剂对蜚蠊腹神经索自发放动作电位的影响.发现杀虫双和杀螟丹均能显著促进自发放动作电位频率和振幅的加强.3.亲和层析法分离纯化了敏感品系、抗杀虫双品系、抗杀螟丹品系小菜蛾的乙酰胆碱受体,发现小菜蛾的乙酰胆碱受体含有3个亚基,大小约为42KD、38KD和28KD.不同品系的乙酰胆碱受体分别与放射性标记的银环蛇毒素结合实验表明:抗性品系的乙酰胆碱受体对银环蛇毒素具有显著的靶标不敏感性.4.双向电泳的方法检测敏感和抗性品系在蛋白质表达水平的差异.通过比较发现敏感和抗溴氰菊酯品系在蛋白质表达水平差异非常显著;杀虫双和杀螟丹同属于沙蚕毒素类杀虫剂,敏感品系与抗杀虫双和抗杀螟丹品系在蛋白质水平的差异极为相似.上述实验结果表明:mariner转座子与抗性之间没有明显的关系;抗杀虫双品系、抗杀螟丹品系小菜蛾的乙酰胆碱受体对沙蚕毒素类杀虫剂有显著的靶标不敏感性;敏感品系和三种抗性品系在蛋白质水平差异明显.

目录

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第一章小菜蛾抗药性研究概况

1.小菜蛾抗药性的形成与发展

2.小菜蛾抗性机制的研究进展

3.小菜蛾的抗性遗传

4.小菜蛾的抗性治理

第一章Mariner转座子与小菜蛾抗性关系的初步分析

1.材料与方法

2.实验结果与分析

3.讨论

第三章杀虫双和杀螟丹的神经毒理学特征的初步分析

1.材料与方法

2.实验结果

3.讨论

第四章不同品系小菜蛾乙酰胆碱受体的纯化及其与配基结合率的分析

1.材料与方法

2.结果与分析

3.讨论

第五章抗感品系小菜蛾蛋白质表达水平的比较与分析

1.材料和方法

2.结果与分析

3.讨论

参考文献

致谢